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(五)混合淋巴细胞培养：用改进的MTT法［5］检测。
(六)动态检测雌性受体BALB/c小鼠体内Y染色体特异的性别决定基因(sex determining region of the Y chromosome, Sry)。
1.引物设计：根据文献报道的小鼠Y染色体特异的Sry核苷酸序列［2］以及引物的设计要求合成引物。利用美国National Biosciences公司编制的Oligo引物分析软件进行电脑辅助设计。引物由中国科学院上海细胞生物学研究所合成。扩增长度为449 bp。
2.雄性C57BL/6小鼠的骨髓细胞悬液0.2 mL(浓度为1.5×107/mL)，由尾静脉分别输注给以下3组小鼠：雌性未转染、空载体转染、重组逆转录病毒转染的BALB/c小鼠［6］。每组各10只小鼠，输入细胞后置标准动物实验室喂养。
3.用PCR动态检测雌性BALB/c小鼠体内的Sry：3、7、10、12、15和30 d。
(七)统计分析方法：实验数据均以表示。多组间比较采用方差分析及Student-Newman-Keuls检验进行两两比较。差异显著性检验采用双侧检验。所有计算采用SPSS for Windows软件在微型计算机上进行。
结果
(一)双向混合淋巴细胞培养：结果见表1。重组逆转录病毒载体转染的BALB/c小鼠脾细胞，对C57 BL/6小鼠的脾细胞增殖反应减弱。与未转染和空载体转染的BALB/c小鼠相比，有显著差异(P＜0.05)。而空载体转染与未转染的BALB/c小鼠相比，无显著差异(P＞0.05)。
表1 小鼠脾细胞体外双向混合培养
Tab 1 The two-way mixed culture of murine splenic
cells in vitro (,n=6)
Origin of lymphocytes OD
1 2
A C57BL/6 BALB/c 0.424±0.041
B C57BL/6 BALB/c(transfection with N2) 0.414±0.034
C C57BL/6 BALB/c(transfection with pXN) 0.258±0.043*
D C57BL/6 C57BL/6 0.158±0.016
E BALB/c BALB/c 0.151±0.018
* P＜0.05, vs A and B
(二)单向混合淋巴细胞培养：结果见表2。经丝裂霉素C处理后的重组逆转录病毒载体转染的BALB/c小鼠脾细胞，刺激C57BL/6小鼠脾细胞增殖的能力减弱。与未转染和空载体转染的BALB/c小鼠相比，有显著差异(P＜0.05)。而空载体转染与未转染的BALB/c小鼠相比，无显著差异(P＞0.05)。C57BL/6小鼠脾细胞经丝裂霉素C处理后，刺激重组逆转录病毒载体转染的BALB/c小鼠脾细胞增殖的能力减弱。与刺激未转染和空载体转染的BALB/c小鼠脾细胞相比，有显著差异(P＜0.05)。而刺激空载体转染与未转染的BALB/c小鼠脾细胞相比，无显著差异(P＞0.05)。
表2 小鼠脾细胞体外单向混合培养
Tab 2 The one-way mixed culture of murine splenic cells
in vitro (，n=6)
Origin of lymphocytes OD
1 2
A C57BL/6 BALB/c(M) 0.312±0.021
B C57BL/6 BALB/c(transfection with N2) (M) 0.306±0.014
C C57BL/6 BALB/c(transfection with pXN)(M) 0.168±0.020*
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