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上皮生长因子受体与非小细胞肺癌肿瘤免疫及转移的相关关系


  一、 材料:
  50例手术切除人肺癌组织标本来自暨南大学医学院附属医院。按照WHO分类判断其组织类型,鳞癌22例,腺癌28例。其中有淋巴结转移或远处转移者32例,无淋巴结转移者18例,伴有转移的病例按TNM分期,轻度(N1)22例,中重度(N2)10例。标本用福尔马林固定,常规石蜡包埋切片。
  二、主要试剂:
   一抗鼠抗人EGFR胞质单抗系Sigma公司产品,B细胞抗体与 T细胞抗体均是武汉生物制品研究所产品,LSAB试剂盒(K681)为DAKO公司产品。
  三、免疫组化染色方法及结果判断:
  常规切片脱蜡水化,按试剂盒说明书采用LSAB方法。DAB染色,苏木素复染。用正常血清取代一抗作阴性对照。选用EGFR表达强阳性标本做阳性对照。
  EGFR阳性细胞的阳性颗粒均呈棕黄色颗粒,定位于胞浆(图1)。肿瘤间质淋巴细胞浸润的T、 B淋巴细胞染色阳性者呈棕黄色,分布于胞浆和胞膜上(图2)。


Fig 1 Immunoreaction for EGFR in lung cancer ×100
图1 肺癌EGFR免疫组化染色


Fig 2  Immunoreaction for T-cell in lung cancer ×100
图2 肺癌组织中的T淋巴细胞免疫染色

  四、图象定量分析:
  免疫组化定量分析用Tigtr 920G图象分析系统(重庆大学ICT研究所),在系统光路中使用450~490 nm,带通光学滤片,每例标本随机检测5个高倍视野,细胞图象通过电视摄像系统扫描,在监视器荧屏上测定细胞EGFR阳性表达的平均光密度(AOD)和积分光密度(IOD),用光密度表示EGFR的相对含量。每例检测的各项参数输入微机汇总,统计各组各项参数的平均值和标准差,进行t检验判断显著性。

结果

  一、EGFR表达与肺癌的分型,转移的关系:
  在50例石蜡肺癌标本中共有120个样本数,EGFR阳性表达均定位于胞浆,阳性细胞在瘤组织内散在分布,正常肺组织未见阳性表达。图象定量分析肺鳞癌与肺腺癌EGFR阳性表达的分布面积和相对含量的变化有显著差异(表1),但与肺癌的分化,转移无明显相关(表2,3)。

表1  EGFR表达量与肺癌组织类型关系
Tab 1  The relation between histological types and contents of EGFR
expression in lung cancer (,n=120)


Group Contents of EGFR expression
Squamous cell carcinoma 0.2796±0.1849
Adenocarcinoma 0.0460±0.0610*

*P<0.05, vs squamous cell carcinoma

表2  EGFR表达量与肺癌的转移关系
Tab 2 The relation between metastases and contents of EGFR
expression in lung cancer (,n=120)


Group Contents of EGFR expression
Squamous cell carcinoma
  Metastasis 0.2289±0.1553
  No metastasis 0.3133±0.1976*
Adenocarcinoma
  Metastasis 0.0476±0.0640
  No metastasis 0.0353±0.0352*

*P>0.05 , vs metastasis

表3  EGFR表达量与肺癌分化的关系
Tab 3 The relation between differentiation and contents of EGFR
expression in lung cancer (,n=120)

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