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砷中毒病区腐植酸对脂质过氧化反应的影响 |
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t disease prevalent areas and areas with an environment rich in arsenic and humic acid．
【Key words】 Humic acid Lipid peroxidation Arsenic Iron
台湾乌脚病的病因之谜．30多年来一直未能揭开，该病临床症状是一种末梢血管闭塞性疾病。主要的病理变化有闭塞性动脉硬化型(arteriosc1erosis obliterans group)和闭塞性血栓血管炎型（thromboangitis obliterans group）；这两种类型的血管病变都与血管内脂质过氧化过程（lipid peroxidation）密切相关，吕锋洲和吕静仪［1］曾报道，乌脚病病人血清中的脂质过氧化物水平明显高于正常人。什么原因引起病人血清中脂质过氧化物含量增高呢？流行病学特征显示，病人都有饮用当地含砷和腐植酸（HA）较高的承压自流井水的历史，因此砷与腐植酸一直被列为重要的可疑致病因子。腐植酸是环境中广泛存在的一种外源性自由基类物质，其中含有大量半醌自由基和羟基自由基。张学林等［2］证实饮水中的自由基浓度与腐植酸含量呈显著的正相关关系。文献报道，大骨节病区饮水中的富非酸对体外培养的鸡胚软骨细胞的损伤行为和羟基自主基类似，能增强鸡胚软骨中的脂质过氧化反应，认为富非酸的损伤作用与脂质过氧化反应有关。
自由基与生物膜上的不饱和脂肪酸作用，生成脂质过氧化物。脂质过氧化物对细胞的损伤包括三个方面：①导致膜功能障碍和膜酶损伤；②生成新的氧自由基造成对酶和其他生物物质的损伤；③扩散脂质过氧化反应醛性产物的毒性。现已知脂质过氧化反应与血管病变、糖尿病、脑中风和视网膜病变等有关，而乌脚病正是一种以四肢、特别是下肢微血管栓塞为特征的地方病，因此研究腐植酸和砷能否引起脂质过氧化反应很有必要。
本项实验研究了腐植酸、砷和铁对脂质过氧化反应的影响，并对从内蒙砷中毒和台湾乌脚病病区井水以及贵州高砷煤中提取出来的腐植酸引发脂质过氧化反应的能力进行了测试对比。
材料与方法
1.样品的来源与制备：商品腐植酸（Aldrich humic acid, A-HA）：购自美国Aldrich Co.公司。内蒙腐植酸（Inner Mongone humic acid, IM-HA）：原水样采自中国大陆内蒙古自治区砷中毒病区巴音毛道农场承压水井，井深约30 m，水中含大量的腐植酸和甲烷气体，用离子交换树脂按文献［3］的方法，从75 L井水中提取出约500 mg的固体腐植酸。台湾腐植酸（Taiwan humic acid, T-HA）：从台湾乌脚病病区台南县北门乡深井水中用低温浓缩法提取。贵州腐植酸(Guizhou humic acid, G-HA）：从贵州省织金县砷中毒病区的高砷煤中，按文献［4］的方法提取。
2．实验方法：腐植酸与不饱和脂肪酸钠盐(FFANa，C18H31O2Na)反应产生的脂质过氧化产物（MDA）按文献［5］用硫代巴比妥酸比色法测定。由于HA本身带有黄色，所以每个剂量的HA都要做一个空白管作为检测背景值在测吸光度时扣除。
结果与讨论
用A-HA与两种不同浓度的FFANa进行了实验，从产生的脂质过氧化物中可以看出单纯的商品腐植酸在试管内也可以引起脂质过氧化反应，但这种作用很弱且很不稳定。
进行了单纯As3+，As3++A-HA以及As3++A-HA＋Fe2+与FFANa反应结果比较。结果发现单纯的砷难以引发脂质过氧化反应。同时还发现砷含量的增加对腐植酸引发的脂质过氧化反应影响也不大。
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