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猕猴桃汁抗环磷酰胺致突变作用的机理 |
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2．药品与试剂：CP（德国Allemagne Alemania公司)；RPMI 1640（JRH Biosciences 公司）；HEPES、刀豆蛋白A、细胞松驰素B、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸三铵盐和Tris（Sigma公司）；考马斯亮蓝G250（Fluka公司）；牛血清白蛋白(电泳纯，中科院生物物理生化厂)；其他试剂均为国产分析纯。
3.动物处理：SD大鼠50只，体重180～220 g，雄性，由北京医科大学实验动物科学部提供。将动物随机分成阴性、阳性对照组和低、中、高三个剂量组，每组10只。实验组分别灌胃给予不同浓度猕猴桃汁（高剂量为猕猴桃原汁，中剂量为稀释3倍液，低剂量为稀释9倍液），灌胃容量1.2 ml/100 g体重，2次/天。对照组灌胃蒸馏水，共7天。末次灌胃前5小时除阴性对照组腹腔注射生理盐水外，其余均注射CP。末次灌胃后1小时，先从大鼠的眼眶采血约1.5 ml，肝素抗凝，用于 CB-MNT；随即宰杀，取出肝脏，按常规方法制备肝S9（肝匀浆经9 000 g离心的上清液）。置-20℃冷冻保存，供生化指标测定用。
4.观察指标与测定方法：
(1)大鼠外周血CB-MNT：按作者曾报告的方法［2］进行。(2)肝S9中蛋白含量测定：用考马斯亮蓝G250法［3，4］测定。(3)肝S9中总GST活性测定：按照Habig改良法［5］测定。(4)肝S9中UDPGT活性测定：按Winsnes法［6］测定。(5)肝S9中γ-GT活性测定： 由北京医科大学附属三院生化室按γ-氨基酰对硝基苯胺法测定。
5.统计学检验：用SPSS统计软件将各实验组与对照组以及各实验组间的结果进行比较，并对某些指标进行相关性检验。微核细胞率经变换后，两组均数间比较用t检验。数据以±s表达。
结果
1. 猕猴桃汁抗CP致大鼠外周血双核淋巴细胞微核形成作用：由表1可以看出，猕猴桃汁处理组双核淋巴细胞微核细胞率显著低于阳性对照组，呈明显剂量效应关系（r=-0.914 6, P<0.01）。
表1 猕猴桃汁抗CP致微核形成作用
组别 动物
数 分裂指数 观察双核淋
巴细胞数 微核细胞数 微核细胞率
(‰，±s)
阴性对照 9
1.11±0.04
8 886
80
9.0±1.3
阳性对照 8 1.15±0.05 8 000 305 38.1±4.3##
低剂量组 8 1.13±0.07 7 112 193 27.5±5.0*
中剂量组 9 1.14±0.03 9 000 192 21.3±3.3**
高剂量组 10 1.15±0.04 10 000 154 15.4±1.8**
与阴性对照组比较，##P<0.01；与阳性对照组比较，*P<0.05，**P<0.01
表2 猕猴桃汁对大鼠肝组织生物转化酶的影响
组别 GST(μmol*min-1*
mg-1)±s(n) UDPGT(nmol*min-1*
mg-1)±s(n) γ-GT(IU/mg)
±s(n)
阴性对照 16.78±
3.91(9) 4.46±
1.56(10) 10.37±
1.11(6)
阳性对照 14.59±
4.47(10) 2.91±
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