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人胎盘脱氢表雄酮的免疫组织化学研究 |
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抗血清(1∶1 000)经过量DHEABSA(1g/L)复合物预先吸收后，作为第一抗体孵育。
3. DHEA免疫反应产物的定量分析
用Q500图像分析系统(美国Leica公司)对不同发育阶段人胎盘绒毛的DHEA免疫反应产物的相对含量进行测定，在光镜下(×100)每例随机取样测5个绒毛断面，10个单位面积，每组共测50个单位面积，计算出每个单位面积的DHEA免疫反应产物的相对含量，用组间t检验方法作统计学处理。
结 果
胎盘绒毛DHEA免疫反应性细胞为深棕色，背底着色淡或不着色，对比鲜明，阳性细胞较易辨认。两组对照实验均为阴性反应(图1)。绒毛的合体滋养层、细胞滋养层和基质细胞均呈DHEA免疫反应性，免疫染色物质分布于胞质内，胞核无免疫反应。在妊娠早期(孕6周)，两层滋养层细胞已出现免疫反应，强度较弱，基质细胞反应比滋养层细胞稍强(图2)。此后DHEA免疫染色逐渐增强，免疫反应物质充满胞质(图3，4)。
图1 正常兔血清替代DHEA抗血清孵育后无免疫反应 ×100
图2 妊娠第6周人胎盘绒毛上皮两层滋养层细胞及基质细胞呈DHEA免疫反应性 ×100
图3 妊娠第16周人胎盘绒毛上皮两层滋养层细胞及基质细胞呈DHEA免疫反应性，反应较第6周强 ×100
图4 妊娠第40周人胎盘绒毛上皮两层滋养层细胞呈DHEA免疫反应性，反应较第16周强 ×100
Fig.1 The negative control shows the negative reaction. ×100
Fig.2 The cytotrophoblasts,syncytiotrophoblasts and stromal cells in 6week placenta, showing DHEA immunoreactivity. ×100
Fig.3 The cytotrophoblasts,syncytiotrophoblasts and stromal cells in 16week placenta, showing DHEA stronger immunoreactivity than that in 6week placenta. ×100
Fig.4 The cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts in 6week placenta, showing DHEA stronger immunoreactivity than that in 16week placenta. ×100
不同发育阶段人胎盘绒毛上皮中DHEA免疫染色图像分析结果见附表。从表中可见，DHEA的相对含量随妊娠周龄的增加而增加。在第7、8、10、24、40周龄组间(附表)，DHEA的相对含量存在非常显著性差异(P<0.01)。图像分析结果与观察结果基本一致。
附表 不同周龄人胎盘绒毛DHEA含量的变化
Table 1 Changes of the content of DHEA immunoreactive
product in developing chorionic villi of human placenta
组别
group
妊娠周龄
gestational
age(weeks)
检测例数
number of
cases
检测单位
面积数
number of
unit area
DHEA相对含量/
单位面积
relative amount of
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