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人胎盘脱氢表雄酮的免疫组织化学研究 |
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蒲若蕾 孙岚 黄威权吕葆真
【摘要】 目的 观察脱氢表雄酮(DHEA)在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。 方法 用免疫组织化学及定量方法。 结果 人胎盘两层滋养层细胞和基质细胞均呈DHEA免疫反应性，反应物质分布于胞质，胞核无免疫反应。在人胎盘绒毛的不同发育阶段中，DHEA的相对含量随周龄的增加而增加。 结论 DHEA对胚胎及胎盘的发育可能具有重要的调节功能。
【关键词】 脱氢表雄酮；定量；免疫组织化学；人胎盘绒毛
【中图分类号】 R321.4 【文献标识码】 A
【文章编号】 0529-1356(2000)02-171
IMMUNOHISTOCHEMICAL LOCALIZATION OF DEHYDRO EPIANDROSTERONE IN DEVELOPING HUMAN PLACENTA
PU Ruolei, SUN Lan, HUANG Weiquan, LU Baozhen
(Department of Histology and Embryology, the Fourth Military Medical University,
Xi′an 710032,China)
【Abstract】 Objective To study the localization and the weekaged change of dehyd
roepiandrosterone(DHEA) in human placenta. Methods Immunohistochemistry and quantit
ation were used in the experiment. Results The syncytiotrophoblast,cytotrophoblast and stromal cells were all appeared DHEA immunoreactivity. The immunoreactivematerial was distributed in cytoplasm with immunonegative nucleus. The relative amounts of DHEA rose with increasing week ages of gestation. Conclusions DHEA might implicate in the development of the placenta and fetus.
【Key words】 Dehydroepiandrosterone; Quantitation; Immunohistochemistry; Human placenta
脱氢表雄酮(DHEA)是由肾上腺皮质分泌的一类重要的甾体类激素前体，在人体含量最高，分布最广泛［1］，具有重要的生物学效应［2］，胎儿体内的DHEA是胎儿生成性激素的前体物质［3］，同时它自身也具有参与调节胚胎大脑皮质神经元生长的生物学效应［4］。但是，至今未见有关它在妊娠期胎盘中含量变化规律的研究报道。本实验应用免疫组织化学ABC法，观察了DHEA在人胎盘绒毛的定位，同时结合图像分析技术，检测了不同发育阶段人胎盘绒毛上皮DHEA相对含量的变化，为DHEA对胎盘的功能意义研究提供形态学依据。
材料和方法
1. 试剂和组织材料
兔抗DHEA抗体为本室自制［5］，ABC药盒为武汉博士德公司产品。
第6、7、8、9、10、16、24、40周人胎盘绒毛各5例，由我校唐都医院妇产科提供。分别取小块新鲜的胎盘绒毛，用4℃生理盐水洗去血液，入4%多聚甲醛固定液固定24h，按常规石蜡包埋法，以熔点50～52℃的石蜡将各组标本分别包埋在同一蜡块内，制成4μm厚的连续切片，并裱贴在同一载玻片上，于37℃恒温箱烤干备用。
2. 免疫组织化学
石蜡切片经脱蜡水化后入PBS(pH7.4)，经甲醇H2O2室温孵育20min，除去内源性过氧化物酶活性，然后按免疫组织化学ABC法进行反应。兔抗DHEA抗体稀释度为1∶1 000，在4℃冰箱内孵育时间为24h，生物素标记的羊抗兔IgG抗体的稀释度为1∶200，ABC复合物的稀释度为1∶100，分别在室温下孵育1h和30min。对照实验设以下两组：(1)用正常兔血清替代DHEA抗血清孵育；(2)DHEA[1] [2] 下一页
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