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试管牛和试管羊胚胎性别的鉴定 |
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黄淑帧 陈美珏 黄英 孙琼 陆建英 任兆瑞 曾溢滔
摘 要： 奶牛和山羊的卵母细胞经过体外成熟、体外受精和体外发育至桑椹期，在显微操作下，吸取4～6个胚胎细胞，应用巢式PCR技术对其DNA进行SRY基因的测定以进行胚胎性别鉴定。共有27枚转有外源基因的试管牛胚胎和207枚转基因试管羊胚胎进行了SRY基因检测。选取10枚经过性别鉴定的牛胚胎移植于8头受体母牛和124枚已知性别的羊胚胎移植于44头受体母羊，移植后妊娠率分别为37．5％（牛，3/8）和61．4％（羊，27/44）。最后产生1头分娩牛犊和2头流产胎牛以及14头分娩羊羔和2头流产胎羊，它们的性别与胚胎性别鉴定的结果完全相符。
关键词： 体外受精； 胚胎； 性别鉴定
中图分类号： Q344＋．2 文献标识码： A 文章编号： 0253－9772(2000)02－0065－04
Sexing the IVF Bovine and Goat Embryos
HUANG Shu-zhen CHEN Mei-jue HUANG Ying SUN Qong LU Jian-ying REN Zhao-rui ZENG Yi-tao
（Shanghai Institute of Medical Genetics,Shanghai Children s Hospital,Shanghai， 200040， China）
Abstract: The oocytes of bovines and goats were subjected to in vitro maturation,in vitro fertilization(IVF)and in vitro development upto morula stage．4～6 embryonic cells were aspirated with micromanipulating and the embryo sexes were identified by detecting SRY gene with nested PCR procedure．A total of 27 transgenic IVF bovine and 207 transgenic IVF goat embryos were performed SRY gene detection．10 bovine and 124 goat sexed embryos were selected to be transferred into 8 bovine and 44 goat recipients,respectively,leading to the pregnant rates of 37．5％( in bovine,3/8)and 61．4％(in goat,27/44)．In the end,1 cattle and 14 goatlets were born at term but 2 fetal bovine and 2 fetal goats were miscarried．Their sexes were fully in accordance with the embryonic sex predetermination．
Key words: in vitro fertilization(IVF); embryo; sex identification
对动物性别控制的研究一直是人们关注的课题之一，特别是对于有经济价值的家畜，如牛、山羊等，尤为如此。近年来，随着转基因家畜研究的进展，人们也希望能按照家畜性别比例的需求，有选择地进行所需性别的转基因家畜的研究和开发。为了达到性别控制的目标，多少年来，国内外的学者一直把研究的焦点集中在着床前的早期胚胎的性别鉴定上，期望通过胚胎性别鉴定后按需要移植某种性别的胚胎，从而达到性别控制的目的〔1〕。20世纪90年代初，我们在阐明奶牛和山羊性别决定基因SRY核心序列的基础上，首次提出并应用PCR扩增奶牛和山羊胚胎的SRY基因序列来鉴定胚胎性别获得成功〔2，3〕， 随后进一步开展了对冷冻胚胎的性别鉴定和移植的研究〔4〕。为了提高动物胚胎性别鉴定技术的实用性，并将这项技术与转基因家畜的研究结合起来，我们最近建立了奶牛和山羊体外受精（即试管奶牛、试管山羊）胚胎的性别鉴定的技术，不仅解决了良种胚胎来源不足的困难，而且为批量化应用于转基因家畜的研究开发和畜牧业生产提供了基础。
1 材料[1] [2] 下一页
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