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蜂毒多肽BVI |
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检测TNFα生物学活性。
1.5 淋巴细胞功能转化实验 按常规方法操作。
1.6 IL-1活性检测 采用胸腺细胞增殖法［1］。
1.7 TNFα活性检测 采用结晶紫染色法［2］。
1.8 统计学方法 采用t检验。
2 结果
2.1 BVI-1、BVI-2、BVI-3对小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响 BVI经S ephadexs G10柱脱盐，高效液相C6柱分离，得到BVI-1、BVI-2、BVI-3。淋巴细胞功能转 化实验结果表明：BVI-2(25 ng/ml)既可抑制小鼠脾淋巴细胞转化，刺激指数可由8.98降 至6.04(P＜0.05)。BVI-1、BVI-3抑制作用效果不明显(图1)。
2.2 BV、BVI、BVI-2对小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响 BV、BVI、BVI -2均可抑制ConA 2.5 μg/ml诱导的小鼠脾淋巴细胞转化，BV的抑制效果最好，当其浓 度为 1 μg/ml时可使刺激指数由7.88降至4.21，并呈一定的剂量依赖关系。BVI-2浓度为50 n g/ml时可使刺激指数降至5.41(图2)。
2.3 BV、BVI、BVI-2对小鼠脾淋巴细胞生成IL-1的影响 BV、BVI、BV I-2均可抑制ConA 2.5 μg/ml诱导的小鼠脾淋巴细胞生成IL-1，并呈一定的剂量依赖关 系 。BV(1 μg/ml)、BVI(200 ng/ml)、BVI-2(50 ng/ml)可使刺激指数由11.973分别降至3. 980、8.500、6.922(图3)。
2.4 BV、BVI、BVI-2对THP-1细胞生成TNFα的影响 BV、BVI、BVI-2 均可抑制PMA 100 ng/ml诱导的THP-1生成TNFα，并呈一定的剂量依赖关系 。BV(1 μg/ml)、BVI(200 ng/ml)、BVI-2(50 ng/ml)可使THP-1细胞生成TNFα的含量由3 .458分别降至2.110、1.550、1.010 ng/ml(图4)。
图1 BVI-1、BVI-2、BVI-3对小鼠淋巴细胞功能转化的影响
Fig.1 Effects of BVI-1、BVI-2、BVI-3 on ConA induced splenocytes pro liferation in mice
Note:*P＜0.05 compare with ConA 2.5 μg/ml
图2 BV、BVI、BVI-2对小鼠脾淋巴细胞转化功能的影响
Fig.2 Effects of BV、BVI、BVI-2 on ConA induced splenocytes proliferat ion in mice
Note:*P＜0.05，* *P＜0.01 compare with ConA 2.5 μg/m l
图3 BV、BVI、BVI-2对小鼠脾淋巴细胞合成IL-1的影响
Fig.3 Effects of BV、BVI、BVI-2 on ConA induced IL-1 production in mi ce
Noote:*P＜0.05，* *P＜0.01 compare with ConA 2.5 μg/ ml
图4 BV、BVI、BVI-2对THP-1细胞合成TNFα的影响
Fig.4 Effects of BV、BVI、BVI-2 on PMA induced TNFα production in THP -1 cells
Note:*P＜0.05，* *P＜0.01 compare with PMA 100 ng/ml
3 讨论
类风湿性关节炎是以关节滑膜细胞的过度增生以及大量T细胞、巨噬细胞、浆细胞浸润为特 征 的慢性炎症性疾病。在疾病的发病初期，大量活化的自身反应性T细胞直接及通过活化 巨噬细胞间接产生大量的促炎细胞因子，如IL-1、TNFα等。IL-1、TNFα可通过促进炎性 细胞 因子、粘附因子、基质金属蛋白酶的表达，抑制细胞凋亡等途径促进疾病的发生、发展。我 室前期工作表明：BVI具有较好的抑上一页 [1] [2] [3] 下一页
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