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蜂毒多肽BVI |
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朱伟 王本祥 朱迅
摘 要 目的：探讨蜂毒多肽BVI中有效的抗炎成份及其作用机制。方法：观察蜂毒多肽对小鼠脾淋巴细胞转化、IL-1合成及THP-1细胞 合成TNFα的影响。结果：蜂毒多肽BV、BVI、BVI-2可抑制ConA(2.5 μg/ml)诱导的小鼠 脾淋巴细胞转化、IL-1合成及PMA(100 ng/ml)诱导的THP-1细胞合成TNFα。结论：利用高效液相分离得到的蜂毒多肽BVI-2具有一定的抗炎作用。
关键词 蜂毒多肽 淋转 IL-1 TNFα
中国图书分类号 R392.12
Effect of polypeptide in bee venom(BVI-2) on T cell an d THP-1 cell
ZHU Wei,WANG Ben-Xiang,ZHU Xun.
(Research Centre of New Drug, Changchun College of Traditional Chinese Medicine;Department of Immunology,Norm an Bethune University of Medical Sciences,Changchun 130021)
Abstract Objective:To select anti-inflammation polypepti de from bee venom and study its mechanism.Methods:To inves tigate the effects of bee venom on splenocyte proliferation、IL-1 production in mice and TNFα production in THP-1 cells.Results:Polypep t ides from bee venom(BV、BVI、BVI-2)inhibited ConA(2.5 μg/ml)induced splenocyte proliferation、IL-1 production in mice and PMA (100 ng/ml) induced TNFα produc tion in THP-1 cells.Conclusion:BVI-2 isolated by HPLC is a main component of anti-inflammation of bee venom.
Key words Bee venom polypeptides Splenocyte proliferati on IL-1 TNFα
蜂毒是指工蜂用其螫针刺向敌害时，从螫针内排出的毒汁，主要由肽类、酶类及胺类物质组 成。我国民间利用蜂毒疗法治疗风湿、类风湿性关节炎等疾病已有悠久的历史，并取得 了较好的治疗效果，但对其具体作用机制研究较少。本室前期工作表明：BV、BVI可抑制小 鼠脾淋巴细胞转化、IL-1及TNFα的生成。在此基础上，本文进一步筛选BVI中 的活性成份，并观察了BV、BVI、BVI-2对T细胞及THP-1细胞功能的影响，以探讨蜂毒疗效 的作用成份及作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 昆明种小鼠，雄性，20 g，由白求恩医科大学动物部提供。
1.2 细胞 THP-1细胞、L929细胞本室保存。
1.3 主要试剂 原蜂毒经离心、超滤、过Sephadexs G50柱，得到BV。BV 经 肝素Sepharose CL-6B亲和柱，得到BVI。BVI经高效液相C6柱，得到BVI-1、BVI-2、BVI -3。TNFα标准品由池岛乔教授惠赠。IMDM购于美国GIBCO公司。ConA、PMA、放线菌素D购于美国Sigma公司。新生小牛血清为大连生物试剂厂产品。3H-TdR购于北京原子能研究所 。
1.4 制备诱导上清
1.4.1 无菌取小鼠脾脏，制成单细胞悬液，分别与ConA 2.5 μg/ml及C onA 2.5 μg/ml和待测样品共同培养26 h，收取上清，检测IL-1生物学活性。
1.4.2 将生长状态良好的THP-1细胞3.2×105 ml-1与PMA 100 ng/ml及PMA 100 ng/ml和待测样品共同培养24 h，收取上清，[1] [2] [3] 下一页
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