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bax基因在小鼠睾丸及实验性隐睾中表达的研究 |
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徐健 许增禄 钱晓菁 徐园园
【摘要】 目的 研究bax基因在正常小鼠睾丸中的表达、定位及隐睾所导致的改变。 方法 以Western-blotting印迹法从蛋白水平检测bax基因在正常小鼠睾丸及实验性隐睾中的表达、变化；原位杂交技术及Northern杂交法从mRNA水平检测bax基因在小鼠生精上皮中的定位及隐睾所导致的改变。 结果 bax基因在正常小鼠睾丸中有弱表达，实验性隐睾导致其表达明显增强，表达细胞主要为精母细胞、精原细胞和精子细胞，支持细胞和间质细胞未见表达。 结论 bax基因可能在生精细胞主动退化的调节中起着重要作用。
【关键词】 bax基因；生精细胞；退化；小鼠
【中图分类号】 Q343.1；Q492.4 【文献标识码】 A 【文章编号】 0529-1356(2000)04-335
THE STUDY OF bax GENE EXPRESSION IN NORMAL MOUSE
TESTES AND EXPERIMENTAL CRYPTORCHIDISM
XU jian XU Zeng-lu QIAN Xiao-jing XU Yuan-yuan
（Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100005,China）
【Abstract】 Objective To investigate bax gene expression and distribution in mouse testes and experimental cryptorchidism. Methods Western-blotting, in situ hybridizaton and Northern hybridization were used. Results bax gene showed low level expression in normal mouse testes. Experimental cryptorchidism induced Bax protein and bax mRNA transcription increased obviously. bax gene expressed mainly in spermatocytes,spermatogonia and spermatids. bax gene expression in both Sertoli cells and Leydig cells was negative. Conclusion bax gene may play an important role in germ cells degeneration.
【Key words】 bax gene; Germ cells; Degeneration; Mouse
生精过程中存在着大量的生精细胞正常的主动退化，但其机制尤其是分子机制仍不清楚。近年，国外一些研究者开始将这种主动退化与细胞凋亡联系在一起。越来越多的证据证明，生精细胞中存在着凋亡，凋亡可能是生精细胞主动退化的重要机制［1，2］。bcl-2基因是1984年Tsujimoto等［3］从滤泡性B淋巴细胞瘤中分离出来的一种癌基因，大量的证据表明它是细胞凋亡的重要抑制基因。随着研究的深入，不断发现一些与bcl-2有不同程度同源性的基因，它们都有高度保守的BH1和BH2功能区，可通过彼此的相互作用来调节细胞凋亡。这些基因统称bcl-2基因家族。其中bax是第一个被分离的bcl-2同源基因，主要编码21kD的膜蛋白，与bcl-2基因功能相反，它促进细胞凋亡。Bax蛋白可以自身形成同源二聚体，也能与Bcl-2形成异源二聚体［4］。但是，bax基因在正常小鼠睾丸中是否表达，对生精细胞的凋亡是否有调控作用，有什么样的调控作用，目前难以定论。本实验采用隐睾建立生精细胞凋亡的模型，从蛋白及mRNA水平检测bax基因在小鼠生精上皮中的表达、定位及隐睾所导致的改变。
材料和方法
1.动物来源及动物模型的建立
中国医学科学院动物所提供的8～10周(26～30 g)健康雄性昆明小鼠。3%戊巴比妥腹腔注射麻醉(1 ml/kg)，将阴囊中的睾丸轻轻推入腹腔，缝合单侧腹股沟管，使小鼠[1] [2] 下一页
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