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AIDS的基因治疗 |
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作用元件(cis-acting element)之间的结合。HIV的Tat与mRNA的TAR序列结合是基因表达所必需的，如果让有TAR序列的RNA分子在细胞内大量表达的话，HIV的Tat就被用于与这个TAR序列的结合，从而减少与mRNA的结合。Gilboa利用反转录病毒载体，让TAR在CD+4 T细胞中表达，成功地培养出抗-HIV感染的克隆细胞；Sullenger BA将HIV-1的Tar或RRE基因插入到带有Pol Ⅲ启动子的反转录病毒载体上，再用其转染CEMss T细胞系，获得了Tar和RRE超表达，HIV的基因表达受抑［10］。美国研究人员改变疱疹病毒基因组，用编码人T细胞受体CD4和fusin序列代替为其被膜蛋白编码的基因，诱骗HIV与其融合，从而解脱对正常T细胞的作用，用这种方法使体外培养的细胞HIV负荷降低到极低水平。
有抗病毒特性的蛋白质中还有反式显性突变(Trans dominant mutant)蛋白质，它是在细胞内发生突变的病毒蛋白质，可抑制有感染力的病毒的增殖。把突变了的Tat和Rev导入细胞内可抑制HIV基因的表达。在由突变反式作用子产生的竞争抑制中，需要有大量的突变分子，但由结构蛋白Gag分子突变产生的反式显性抑制，在病毒粒子形成之际把突变的Gag和正常的Gag同时组装进去，以此来抑制病毒的成熟或产生不具感染力的粒子，用很少的分子数就可得到理想的效果，但目前还难以找到高效表达Gag的载体。
近几年有报道，可溶性CD4分子(sCD4)和sCD4与免疫球蛋白的杂化分子可在体外抑制HIV和T细胞表面CD4分子的结合。把sCD4的表达载体导入T细胞可使之在血液中持续分泌sCD4。将重组的sCD4注射到HIV-1感染的患者体内的治疗方法曾进入Ⅰ期临床试验。将sCD4-Ig融合蛋白基因插入HIV-1 LTR下游，通过Tat可诱导该基因表达，并可见明显的抑制HIV-1感染的效应。
四、AIDS基因治疗的载体和靶细胞：AIDS基因治疗的另一重要问题是要找出能把抗-HIV的基因高效地导入T淋巴细胞并使之表达的载体。反转录病毒载体是基因治疗中应用最多的载体。构建反转录病毒载体时，用目的基因取代病毒结构基因，保留病毒信号和两端的LTR，再转移到包装细胞中。现常用小鼠反转录病毒(MoMLV)构建重组病毒载体，可以用它将基因导入多种细胞内，被导入的基因可被高效率地、稳定地组装进染色体中。但载体构建有可能会导致具有传染力的新病毒的出现，基因的表达效率也低。岛田氏［7］发现在淋巴细胞中人的B19细小病毒的启动子具有高于SV40启动子5倍以上的活性，他进行了由tRNA的PolⅢ启动子参与的抗HIV-RNA的表达试验。Gilboa使用tRNA启动子能够使TAR decoy的表达达到全部Poly A RNA量的5%。
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