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细胞色素p450对大鼠心肌缺血 再灌注损伤的影响 |
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45 mg/kg)腹腔注射麻醉后,人工呼吸下开胸,采用冠状动脉左前降支(left anterior descending ,LAD)结扎和松开的方法复制心肌缺血/再灌注模型。用RM-6200四道生理记录仪（日本元件，国内组装）连接计算机记录II导心电。计算室性早博发生次数（ventricular extrasystole, VE）；室性心动过速发生率（ventricular tachycardias rate, VTr）及累计持续时间（ventricular tachycardias time, VTt）；室颤发生率（ventricular fibrillation rate, VFr）及累计持续时间（ventricular fibrillation time, VFt）；心电不稳持续时间（lasting time, LT）；并参照Cutis［4］和Ravingerova［5］等方法制定下述标准对室性心律失常（ventricular arrhythmias,VA）评分。0分：无VA或有<5次的VE； 1分：仅有≥5次VE； 2分：仅有一阵＜60 s 的VT； 3分：有一阵≥60 s或多阵累计＜60 s的VT； 4分：多阵VT，累计＞60 s； 5分：出现VF； 6分：出现持续5 min以上的VF或在观察期间死亡。鉴于大鼠心肌缺血性心律失常分为2期［6］，采用缺血10 min和缺血60 min 2种模型观察缺血性心律失常；而再灌心律失常受缺血时间的影响，故主要观察发生率最高的缺血10min再灌注心律失常。
实验完毕，结扎LAD，自左心室注入饱和曲利本兰，显示缺血范围；缺血1 h再灌30 min动物取下心脏后，采用TTC染色显示梗塞范围。采用图象分析系统（Q550-IW型，德国产品）计算左心室面积（left ventricular zone, LV），缺血濒危区（risk zone, RZ）及梗塞区面积（infarct zone, IZ）。以缺血范围%（RZ/LZ）和梗塞范围%（IZ/RZ）表示之。缺血10min再灌10 min动物各组1只，电镜取材，制片，观察心肌超微结构变化。实验分为6组，均于冠脉结扎前20 min静脉给予同容积（1 mL/100 g体重）物质。其中对照组（control）给予生理盐水；细胞色素p450单氧化酶抑制SKF525a(SKF)组给予0.54 mmol/L SKF525a、clotrimazole(CLO)组给予0.9 mmol/L clotrimazole；外源性EETs组（EET）给予0.2 μg/100 g 11, 12-EET; EETs加钙敏感性钾通道阻滞剂组（EET-TEA），给予同量的11,12-EET及30 mmol/100 g四乙胺（tetraethylammonium, TEA）；而 EETs加ATP敏感性钾通道阻滞剂组（EET-GLI），则给予同量的11,12-EET及0.25 mmol/100 g glibenclamide(GLI)。各组又分为A组（缺血10 min，再灌10 min）和B组（缺血1 h，再灌30 min）。
数据以表示。各组间记量资料的比较采用单因素方差分析，差异显著性用Student-Newman-Keuls法进行两两比较。各组间计数资料的比较采用χ2检验。
结果
(一)各组间大鼠的心肌缺血范围均无显著差异（P＞0.05）。
(二)各有关物质对缺血性心律失常的影响见表1和表2。各组大鼠缺血期（包括缺血10 min和缺血60 min）心律失常的首发时间结果见图1。对再灌注心律失常的影响见表3。缺血/再灌注后心肌梗塞范围的变化见图2。
表1 缺血10 min心律失常指标变化
Tab 1 The arrhythmia in 10 min occlusion of LAD（n=10，）
Group VTr VTt (s) VFr VFt (s) LT (min) VA score
Control 90% 39.5±39.0 10% 0.1±0.3 2.40±1.12 3.0±1.2
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