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应用小鼠整体试验对自来水中有机污染物潜在危害的评价 |
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er had potential carcinogenic effects on mammal animals.
Key words Hazardous substances Water supply Chromosome aberrations Immunity Oxidoreductases Cytochrome P-450
目前研究表明，以地面水为水源，经氯化消毒处理的自来水具有致突变性［1］，并且其致突变性在逐年增强。 以H市自来水为例，1986年平均3 L自来水中的有机浓集物Ames 试验结果阳性， 而1996年平均1 L自来水中的有机浓集物即可出现相同的结果［2］。自来水中有机浓集物的致突性已成为令人瞩目的卫生问题。国内外有关研究资料绝大部分来自体外测试系统，但自来水中有机浓集物对人体的实际危害是不可能完全由体外测试系统来推论的。为此，我们进行了一些哺乳动物的整体试验，旨在进一步估价自来水中有机浓集物对机体的潜在危害。
材料与方法
一、试剂
XAD-2树脂为Sigma公司产品，乙氧基异吩恶唑和异吩恶唑由澳大利亚悉尼大学Stacey NH博士惠赠，其他化学试剂均为市售分析纯试剂。
二、水样处理
水样为H市普通自来水管道水，通过XAD-2 树脂柱吸附水中有机污染物，用二次重蒸乙醚洗脱吸附柱，KD浓缩器浓缩至干，分别用色拉油或二甲基亚砜(DMSO)溶解、定容备用。
三、动物试验
昆明种小白鼠由黑龙江省肿瘤研究所实验动物中心提供。体重28～32 g（免疫毒性试验中动物体重20～24 g）。每项试验均选雄性动物40只，随机分成4组，每组10只。
1．小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE) 微核试验和睾丸染色体畸变分析：剂量分别相当于50 L/kg和200 L/kg的自来水中有机浓集物，以色拉油为溶剂，按1%灌胃容积灌胃染毒，每日1次，连续3日。阴性对照组投予等容积色拉油。阳性对照组动物两次腹腔注射环磷酰胺（40 mg/kg），间隔24小时。各组动物均取5只在末次染毒同时腹腔注射0.04%秋水仙素4 mg/kg。 6小时后，同时取股骨和睾丸，分别按常规方法进行骨髓PCE 微核试验和睾丸精母细胞染色畸变分析。
2．免疫毒性试验：剂量分别相当于6 L/kg和18 L/kg的自来水中有机浓集物，连续灌胃2周。阴性对照组灌胃等容积色拉油。 阳性对照组在试验的第12天和13天腹腔注射环磷酰胺30 mg/kg。 按常规方法分别进行溶血空斑试验、迟发变态反应检测和腹腔巨噬细胞吞噬试验。
3．肝微粒体酶试验：剂量分别相当于10 L/kg、50 L/ kg 和100 L/kg的自来水有机浓集物，以DMSO为溶剂，按1%容积每日腹腔注射1次，连续2日。对照组动物腹腔注射等容积DMSO， 末次染毒后24小时处死动物。在0～4℃条件下制备肝匀浆，经9×103离心20分钟，取上清液为S9组分，分装后保存在-80℃备用。 按改良Chaykin法(1966年)测定S9蛋白质含量。按Prough等［3］介绍的方法测定乙氧基异吩恶唑O-脱乙基酶(ethoxyresorufin O-decthylase,EROD）活性。
四、统计
骨髓微核试验结果用Poisson u检验， 睾丸染色体畸变分析数据用χ2检验，免疫学检测结果和EROD活性采用方差分析及均数t检验。
结果
1．小鼠骨髓PCE微核率及睾丸染色体畸变率：在相当200 L/kg自来水中有机浓集物剂量染毒条件下，小鼠骨髓PCE 微核数明显增高（表1），约为对照组的1.7倍。同剂量下睾丸染色体畸变数升高为对照组的3.5倍（表2），在低剂量(50 L/kg)条件下与阴性对照组差异有显著性，表明自来水有机浓集物对小鼠体细胞及生殖细胞染色体均有损伤作用。
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