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IFN IL |
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曹艳英 郭辉玉
登革病毒感染是热带和亚热带地区严重的公共卫生健康问题，登革病毒的主要靶细胞是单核细胞。有关其发病机制近年来注意到细胞因子的释放，本课题以人单核细胞为登革Ⅱ型病毒(D2V)感染的靶细胞，研究IFNα、IL-1β和IL-2对D2V复制的影响，试图对其发病机制进行探讨。
材料和方法
一、材料
(一) IL-1β、IL-2、IFNα，军事医学科学院生物制剂部提供。
(二) 病毒 D2V标准株(New Guinea C株)，本室自行传代保存。
二、方法
(一) 人单核细胞的分离 取正常人外周血和脐带抗凝血，用淋巴细
表1 IFNα对人单核细胞中D2V复制的影响 (±s)
IFNα(u/ml)
病毒滴度(103pfu/ml) (n=6)
病毒吸附前 病毒吸附同时 病毒吸附后
0 9.42±2.81 8.08±2.79 8.17±2.52
10 6.67±3.32 7.92±3.11 7.75±2.39
100 3.00±0.67* 6.08±1.67 7.08±1.91
1000 0.25±0.25* 0.67±0.38* 1.38±0.64*
* P<0.05
表2 IL-1β对人单核细胞中D2V复制的影响 (±s)
IL-1β(u/ml)
浓度 病毒滴度(103pfu/ml) (n=6)
病毒吸附前 病毒吸附同时 病毒吸附后
0 10.50±3.78 11.58±4.04 8.42±1.75
1 7.67±3.75 10.42±5.13 8.08±2.26
10 5.25±2.50* 6.25±2.54* 6.00±2.18
100 2.84±0.52* 4.50±1.09* 5.58±1.51*
* P<0.05
表3 IL-2对人单核细胞中D2V复制的影响 (±s)
IL-2(u/ml)
浓度 病毒滴度(103pfu/ml) (n=6)
病毒吸附前 病毒吸附同时 病毒吸附后
0 7.83±2.13 8.25±2.46 8.75±1.75
1 13.83±3.62* 9.25±2.28 17.83±2.57*
10 21.75±4.56* 11.83±3.82* 21.17±3.66*
100 6.92±2.32* 7.50±2.29* 8.33±1.91*
* P<0.05 胞分层液分离出单个核细胞。细胞贴壁培养3天去非贴壁细胞，等量0.02%EDTA与20%FCS1640混合液消化15分钟后收集贴壁细胞，用培养液洗两遍，细胞用于D2V感染。
(二) D2V感染人单核细胞 取人单核细胞计数1×105/孔 加入24孔板中，设四组，阴性对照组，细胞因子低浓度(IL-1β lU/ml、IL-2 1U/ml、IFNα 10U/ml)、中浓度(IL-1β 10U/ml、IL-2 10U/ml、IFNα 100U/ml)、高浓度(IL-1β 100U/ml、IL-2 100U/ml、IFNα 1000U/ml)。选择不同的时间加入细胞因子：病毒吸附前为细胞因子与细胞温育24小时再感染D2V；病毒吸附同时为细胞因子和病毒[1] [2] 下一页
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