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体外循环术中心肌缺血 |
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CCC group (P＜0.01). All the corresponding mRNA was unchanged in CWBC group (P＞0.05).②CO and LVESP were markedly depressed in both groups (P＜0.01), but compared with CWBC group far more depressed in ICCC group (P＜0.01). ③Cellular ultrastructure injury were observed in ICCC group, while it was generally well preserved in CWBC group.Conclusion During CPB, a molecular repairing of SR calcium regulatory proteins occurs in the early time of reperfusion after ischemia, and this molecular repairing might be assoiated with the severity of myocardial I-R injury.
【Key words】 I-R Myocardium SR Ca2＋ ATPase Calsequenstrin RT-PCR mRNA
体外循环术中，心肌经历缺血-再灌注(Ischemia-reperfusion, I-R)损伤后，可发生心肌顿抑现象，甚至遭致严重的低心排综合征。阐明I-R损伤的发生机制，可望提高术中心肌保护的效果。迄今为止，除了氧自由基作用、活化的中性白细胞作用和近年提出的No作用外，心肌细胞“Ca2＋超载”，一直被认为是I-R损伤的一个重要病理机制［1］，而心肌细胞中肌浆网(sarcoplasmic reticulum， SR)功能障碍被认为是Ca2＋超载的重要原因之一。SR受到多种SR Ca2＋调节蛋白(sarcoplasmic reticulum calcium regulatory protein)协同控制。研究已经表明，这些蛋白的损伤，导致了SR失功［2］。显然，更深一步地研究编码这类蛋白的mRNA的表达变化，有助于了解心肌I-R损伤的发生机制。我们用RT-PCR方法，检测体外循环术中心肌I-R损伤后SR Ca2＋-ATP酶(SR Ca2＋-ATPase)、钙螯合蛋白(calsequenstrin)两种心肌细胞SR Ca2＋调节蛋白基因表达水平，同时观察心功能和心肌细胞超微结构的变化。实验旨在探讨心肌I-R损伤的分子生物学机制。现报道如下。
材料与方法
1.动物模型的建立 健康成年杂种家犬(n=12)，雌雄不拘，体重15～22 kg，随机分为冷晶心停跳液间断灌注(intermittent cold crystal cardioplegia, ICCC)组(n=6)和温血停跳液持续灌注(continuous warm blood cardioplegia, CWBC)组(n=6)。氯氨酮诱导、硫喷妥钠静脉滴注维持麻醉。颈动脉、颈静脉插管，测定动脉压、中心静脉压；心尖部插管，接压力换能器，测定左室收缩末期压(LVESP)；主动脉根部安置电磁流量计，测定心输出量(CO)；气管切开插管，呼吸机辅助呼吸；监测EKG；测鼻咽温度。胸部正中切口进胸，全身肝素化后，经主动脉、上、下腔静脉插管，建立体外循环(Polystan Denmark转子泵，西京90型鼓泡式氧合器)，开始转流。晶体液预充，中度血液稀释，流量：CWBC组100 mL．(kg．min)-1，ICCC组80 mL．(kg．min)-1。CWBC组常温、冷晶组血液温度降到浅低温(28℃)后，上、下腔静脉阻断，主动脉根部阻断，立即按分组顺序行灌注不同的停搏液心肌保护(同时切开右房，经卵圆窝切口放置左房引流)：①CWBC组：参照文献［3］，以4∶1氧合温血心停跳液灌注。主动脉根部阻断后，首先灌注一次高K＋氧合温血(［K＋］20 mmol/L，流量4 mL．(kg．min)-1，共5 min)，继之持续灌注低K+氧合温血(［K＋］8 mmol/L，流量2 mL．(kg．min)-1)。心包腔局部保持常温。氧合温血中晶体液配制参照改良Fremes'液配方［4］。从冠状静脉窦流入右房的灌注液持续冠状吸收回收，参与体外循环；②ICCC组：以常规冷晶体停搏液灌注。全身浅低温体外循环，主动脉根部阻断后，灌注冷晶体心停跳液(上海长征制药厂，仁济医院配方)上一页 [1] [2] [3] 下一页
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