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抗Sa抗体的检测及其临床意义 |
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1994年加拿大学者Despres等［1］首次报道从人脾脏中提取Sa抗原，应用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)在42.7%类风湿关节炎(RA)患者中检测出抗Sa抗体，特异性高达98.9%；且病程小于1年者的阳性率为29%。本文采用Despres方法从新鲜人胎盘中提取Sa抗原，检测RA和其他风湿性疾病的抗Sa抗体，了解其临床意义，报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象
试验组RA 192例，均符合1987年美国风湿病学会(ARA)修订的RA分类标准［2］。男性58例，女性134例，年龄17～76岁，平均46.1岁。其中早期RA(病程小于1年，X线无明显骨质侵蚀者)31例。采集血清时记录同期的临床、实验室指标，关节表现采用28关节计分法［3］，医师和患者对病情活动性的评估及患者对关节痛的自我评估采用ARA推荐的10 cm视力表评定。
对照组294例，包括系统性红斑狼疮(SLE)73例，强直性脊柱炎(AS)40例，其他脊柱关节病(SpA)16例，骨性关节炎(OA)27例，痛风(Gout)15例，皮肌炎(DM)8例，其他风湿病62例，以上病例均符合目前的国际诊断标准；正常人53名。
1.2 检测方法
1.2.1 抗原提取：在4 ℃下操作。新鲜人胎盘匀浆后离心，取上清，加入阴离子交换剂DE52搅拌，用不同浓度的洗脱液洗脱，行透析及冷冻干燥，－30 ℃保存。标准抗原由北京协和医院张乃峥教授提供，该抗原与Despres提供的标准抗原相比条带一致。
1.2.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳：取4 mg Sa抗原溶于200 μl SDS-PAGE样品缓冲液中，在10%分离胶中电泳。将分离的蛋白转移到硝酸纤维膜上，再与待测血清反应，所有待测血清均1∶40稀释。然后加入1∶500稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体。加入底物溶液(DAB显色液)反应，待蛋白质条带清晰后加入终止液。以标准分子量标记物半对数作图，相对分子量50 000或50 000、55 000出现印迹条带者为阳性。
1.3 统计学处理
应用SPSS统计软件行t检验、χ2检验、方差分析等，取α＝0.05为显著性检验标准。
2 结 果
2.1 抗Sa抗体对RA诊断的敏感性和特异性：抗Sa抗体对RA诊断的敏感性为33.9%(65/192)，特异性为96.9%(SLE 8例阳性、DM 1例阳性)，阳性预报率为87.8%，阴性预报率为69.2%；早期RA中抗Sa抗体阳性率为32.3%(10/31)。9例检测时不能确诊，经随访确诊RA患者中4例抗Sa抗体阳性。
2.2 抗Sa抗体单独出现50 000条带与同时出现50 000、55 000两条带的比较：65例抗Sa抗体阳性RA中，同时出现50 000、55 000两条带者15例，单独出现50 000条带者50例。前者在医师对病情活动性的评分、患者对病情活动性的自我评分、患者对关节痛的自我评分、C反应蛋白(CRP)增高等方面较后者明显增高，红细胞沉降率(ESR)、IgG虽无差异，但亦增高。同时出现50 000、55 000两条带者病情活动性较高。
2.3 抗Sa抗体与RA临床、实验室指标的关系(表1～3)：抗Sa抗体阳性组以小关节起病为主，类风湿因子(RF)阳性滴度明显较阴性组高，其他临床、实验室指标差异无显著性。63例RF阴性RA中，抗Sa抗体阳性17例，阳性率为27%。按病程分组，病程＜1年抗Sa抗体阳性者X线病情分期Ⅱ级较阴性者多(Ⅲ、Ⅳ级均缺如)。抗Sa抗体阳性组和阴性组RF、抗核周因子(APF)、抗鼠食管角质层抗体(AKA)、抗RA33抗体、抗核抗体(ANA)阳性率比较差异无统计学意义。
表1 192例RA抗Sa抗体与临床 实验室指标关系比较(±s)
项目 抗Sa抗体阳性(65例) 抗Sa抗体阴性(127例) P值
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