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肾综合征出血热患者血清IL |
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to the serum β2-microglobulin (β2-MG), blood urea nitrogen (BUN) and ereatinine (Cr). Significant positive relationships were found both between urine IL-6 and TNF, and between IL-6 and IL-8 (r=0.5621, P?.05; r=0.3845, P?.01). Conclusion TNF, IL-6 and IL-8 were highly activated during the course of the disease. IL-6 was associated with the immunopathological lesions caused by the hyperfunction of humoral immune response. IL-6, IL-8 and TNF were involved in the renal immune impairment and their determinations might be used in predicting the prognosis and outcome of patients with HFRS to certain extent. 【Key words】 Hemorrhagic fever with renal syndrome Interleukins Tumor necrosis factor
近年的研究表明,免疫调节功能异常在肾综合征出血热(HFRS)发病中有重要 意义,特别是体液免疫功能亢进,产生过量的抗原抗体复合物,继发免疫反应; sTs细胞功能低下,T+8细胞明显增多,细胞免疫调节失常[1~3]。我们应用ELISA 法检测HFRS患者血清白细胞介素(IL)-6、尿液IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)、IL-8含 量的动态改变,分析IL-6与血清特异性IgM、IgG抗体及β2-微球蛋白(β2-MG)的相 互关系,探讨其在HFRS发病中的作用。
对象与方法
一、研究对象
对象为1992~1995年我院传染科、西安市传染病医院经检测HFRS特异性IgM 和IgG抗体阳性的住院患者,共48例,其中男38例,女10例,平均年龄36.8(18~61) 岁;轻型10例,中型20例,重型10例,危重型8例(1例死亡)。诊断与分型根据1986年 南京全国流行性出血热临床专题会议制定的标准。全部病例从入院之日起隔日采 血1次,共165份,隔日留集尿液,共156份,-20℃保存。
正常对照组20例,男女各10例,平均年龄30.5(24~35)岁。均为健康献血 员,HFRS特异性IgM和IgG均阴性,肝、肾功能正常,肝炎病毒感染指标均为阴性。
二、试剂
抗IL-6、TNF、IL-8单克隆抗体、标准品及阴性对照均由第四军医大学免疫 学教研室金伯泉教授提供;荧光抗原片由陕西省预防医学研究所自制并提供;羊 抗人IgM、IgG异硫氰酸荧光素标记物,β2-MG检测试剂盒由上海生物制品研究所 提供。
三、实验方法
血清总球蛋白测定采用双缩脲法;特异性IgM、IgG测定采用间接免疫荧光 法[4];β2-MG测定采用特异性放射免疫法,按药盒说明进行;IL-6、IL-8、 TNF测定采用ELISA法:将稀释好的包被抗体加入ELISA板(96孔聚苯乙烯ELISA微 量反应板,购自丹麦Maxisorp公司),每孔100 μl,4℃放置48小时;洗涤ELISA 板3次,加待测样品,阴性对照及倍比稀释的标准品,每孔100 μl,37℃,2小时; 洗涤3次,加入稀释好的酶标抗体,每孔100 μl,37℃,1小时;洗板3次,加入 配好的ABTS显色液,每孔100 μl,37℃显色30分钟;ELISA读数仪测410 nm处吸 光度(A)值,绘制标准曲线,再测定血清标本的含量。
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