GluR5和GABAARβ阳性神经元的数量。高密度:≥10个/100 μm2;中等密度:6~9个/100 μm2;低密度:≤5个/100 μm2。对上述各组的计数结果进行配对t检验。 结果
1. 行为变化:KA组给药后平均3 min出现肢体抽搐、跌到及强直-阵挛性抽搐,呈重型发作。VNS+KA组平均 5 min出现行为变化,表现为须动和头面部抽搐,呈轻型发作。
2. 免疫组化结果:在孤束核的全长均可观察到GluR5和GABAARβ阳性神经元、神经纤维和末梢。GluR5和GABAARβ阳性反应产物不仅位于胞体和突起的膜上,而且位于胞质内;阳性纤维具有粗细均匀、行径较直、膨体较丰富等特点;阳性末梢多呈点状(图1~6)。
在对照组动物的孤束核内可见中等密度[(7.2±0.7)个/100 μm2]的GluR5和中等密度[(8.2±0.4)个/100 μm2]GABAARβ阳性神经元(图1、4)。GluR5和GABAARβ阳性神经元多为中等大小(直径为20~35 μm),呈梭形、三角形和圆形。GABAARβ阳性神经元的突起较长,小的(≤19 μm)和大的(≥36 μm)的GluR5和GABAARβ阳性神经元较少见。GluR5和GABAARβ阳性纤维和末梢较稀疏(图1、4)。KA组动物孤束核内可见高密度[(15.3
±1.1)个/100 μm2]的GluR5阳性神经元,阳性神经元的染色明显变深,GluR5样阳性纤维和末梢的密度增加(图2)。而GABAARβ阳性神经元的数量减少[(4.2±0.4)个/100 μm2],阳性神经元的染色明显变浅,神经纤维和末梢的密度明显降低(图5)。KA组与对照组动物孤束核内的GluR5阳性神经元、神经纤维和末梢的密度比较,差异有显著意义(P<0.01);GABAARβ阳性神经元、神经纤维和末梢的密度比较,差异也有显著意义(P<0.05)。见表1。 VNS+KA组动物孤束核内GluR5和GABAARβ阳性结构的密度变化与KA组相反,即GluR5阳性神经元的数量明显减少[(6.3±0.7)个/100 μm2],基本上恢复到正常水平,但染色变淡(图3);GABAARβ阳性神经元增加[(9.3±0.4)个/100 μm2],也基本上恢复到正常水平,但染色变深(图6);GluR5和GABAARβ阳性纤维和末梢的密度也发生与阳性神经元相类似的变化(图3、6)。VNS+KA组与KA组的GluR5阳性结构的密度和GABAARβ阳性结构的密度比较,差异均有显著意义(P<0.01,P<0.05);VNS+KA组与对照组的GluR5和GABAARβ阳性结构的密度比较,差异无显著意义(P>0.05)。见表1。
表1 大鼠孤束核内谷氨酸受体和
γ-氨基丁酸A受体的密度(±s,个/μm2)
动物分组鼠数谷氨酸受体5γ-氨基丁酸A受体NC组87.2±0.7
8.2±0.4
KA组815.3±1.1**4.2±0.4*VNS+KA组86.3±0.7△△9.3±0.4△ 注:NC:对照组;KA:红藻氨酸;VNS:迷走神经刺激; 与NC组比较,*P<0.05 **P<0.01; 与KA组比较, △ P<0.05 △△ P<0.01 GluR5和GABAARβ阳性结构的上述密度变化主要见于孤束核的中、尾段,而各组动物双侧阳性神经元计数无明显差异(P>0.05)的孤束核吻段,其GluR5和GABAARβ阳性结构密度亦无明显变化。另外,在与孤束核紧邻的迷走神经运动核内,也可见到GluR5和GABAARβ阳性神经元,各组动物迷走神经运动核内的GluR5和GABAARβ阳性神经元的数量也几乎不发生变化。
用正常兔血清或正常小鼠血清代替第1抗体孵育切片的对照实验结果均为阴性。
讨论
中枢神经系统内的氨基酸类物质是独具特色的神经递质,以其对突触后神经元的兴奋性或抑制性作用又可分为两类,两者分别以谷氨酸和GABA为其典型代表。它们广泛地分布于中枢神经系统,在中枢神经系统的突触传递过程中发挥着重要作用[5-7]。
GluR分为代谢型GluR(mGluR)和离子型GluR(iG
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