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滑膜巨噬细胞与类风湿关节炎病情活动及关节破坏的相关性

26年,平均病程(8.90± 7.09)年;非RA组的骨关节炎(OA)滑膜14例,男6例,女8例,年龄39~75岁,平均年龄(51 .43±13.91)岁,病程8个月~20年,平均病程(12.99±7.59)年,外伤性关节炎滑膜6例 ;正常滑膜7例,取自半月板损伤患者。
1.2 滑膜巨噬细胞的检测:滑膜组织离体后立即用10%甲醛固定,常规脱水、石蜡包埋、 连续切片,切片厚度为4 μm,分别作为HE染色和CD68免疫组化染色(LSAB法[5])。 CD68检测时需进行微波修复抗原,CD68单抗(DAKO,M0814)工作液浓度为1∶200,DAB显色, 苏木素复染核。以PBS代替一抗作为阴性对照。CD68阳性细胞为胞浆棕黄或棕褐色。结果观 察阳性细胞的分布并计数。衬里层CD68阳性细胞百分数为衬里层CD68阳性细胞数占衬里层总 细胞数的百分数,并进一步分为:①<10%;②10%~25%;③25%~50%;④50%~75%;⑤≥7 5%。衬里下层CD68阳性细胞数为5个高倍视野衬里下层CD68阳性细胞数的平均数。
1.3 其他实验室指标:类风湿因子(RF)滴度采用乳胶凝集法,血沉(ESR,mm/1h)采用魏氏 法,C反应蛋白(CRP,mg/L)采用火箭电泳法。
1.4 临床资料:所有患者留取滑膜标本的同时记录其临床资料,包括关节疼痛数、关节肿 胀数、晨僵时间(分)、握力(mm Hg,取双手平均值)及双手X线照片结果。X线结果采用改良的Sharp评分法计算关节破坏的侵蚀积分和狭窄积分[6]。
1.5 统计学方法:两组计量资料的均数比较采用t检验,两组等级资料的比较采用非参数检验(Mann-Whitney U检验)。采用Pearson相关系数和Spearman等级相关系数进行双变量相关分析。P<0.05为差异显著。

2 结 果

2.1 滑膜CD68染色结果:正常滑膜衬里层细胞几乎全部CD68阳性而衬里下层CD68阳性细胞极少。RA和非RA滑膜衬里层滑膜细胞大部分CD68阳性,尤其是RA滑膜表层的滑膜细胞几乎全部CD68阳性,衬里下层也见较多的CD68阳性细胞。RA与非RA滑膜CD68阳性细胞数的比较见表1。

表1 两组滑膜CD68阳性细胞数的比较


组别 n 衬里层CD68阳性
细胞百 分数1) 衬里下层CD68
阳性细胞数2)
RA滑膜 26 16.3 43.4±20.1
非RA滑膜 20 14.5 22.3±12.8

 注:1)数值为平均秩(Mean Rank),P>0.05
2)P<0.05
2.2 活动期RA滑膜巨噬细胞数与病情活动指标之间的相关性:见表2。

表2 活动期RA滑膜巨噬细胞数与病情活动指标之间的相关系数


病情指标 ±s 衬里层CD68阳性
细胞百分数 衬里下层CD68
阳性细胞数
关节疼痛数 22.3±18.5 0.27 0.391)
关节压痛数 19.0±13.9 0.411) 0.451)
关节肿胀数 12.8±9.3 0.15 0.23
晨僵(分) 130.2±98.1 0.08 0.16
握力(mm Hg) 63.6±42.8 0.29 0.37
ESR(mm/1h) 68.7±47.5 0.30 0.531)
CRP(mg/L) 21.3±16.2 0.36 0.572)

         注:1)P<0.05
           2)P<0.01

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