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转化生长因子 1在慢性乙型肝炎患者肝细胞损伤和肝纤维化形成中的意义 |
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ole in the pathogenesis of liver fibrosis. The detection of serum TGF-β1 is of high value in diagnosing liver fibrosis. diagnostic value in liver fibrosis.
【Key words】 Transforming growth factor-β1 Liver cirrhosis Hepatic tissue pathology
肝纤维化的基本原因是肝脏细胞外基质(ECM)的合成与降解之间平衡的失调，因此寻找调控ECM的细胞因子，在肝纤维化的诊断和治疗中具有重要意义。我们观察了76例慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)患者血清转化生长因子β1(TGF-β1)水平的变化，与血清Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、肝功能、肝组织病理改变以及肝组织内纤维含量进行对比分析，旨在从细胞因子水平和病理的角度探讨TGF-β1在CHB肝纤维化发病机制中的作用，为CHB肝纤维化的诊断和治疗提供理论依据。
材料和方法
一、病例选择
76例CHB、LC患者均为1997年7月至1998年5月我科住院患者，诊断符合1995年(北京)第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的诊断标准［1］。其中慢性轻度20例，男12例，女8例，年龄(40.5±11.8)岁；中度20例，男15例，女5例，年龄(40±12.1)岁；重度18例，男16例，女2例，年龄(44±12.6)岁；LC18例，男14例，女4例，年龄(51±10.7)岁。上述病例经血清检查均排除了甲、丙、丁、戊型肝炎病毒感染。同时以20例体验正常人员，男15例，女5例，年龄(42.5±11.3)岁做对照。各组间性别和年龄分布差异无显著性。
二、标本采集及保存
所有病例均于入院后次日抽取空腹不抗凝静脉血3ml，待血块收缩后，以2 000r/min离心10分钟，取血清置-20°C冰箱保存，集中专人检测。同时分别检测PCⅢ、LN、HA、肝功能及甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒标志。
76例中29例于住院1周内做肝组织活检，采用经皮肝穿刺术，选用16号国产针头快速负压抽吸。肝组织经生理盐水冲洗、10%福尔马林固定后石蜡包埋，标本经连续切片行HE染色。按病理组织学诊断标准［1］将其分为轻、中、重度三组，然后每组取5例做胶原纤维和网状纤维染色。
三、血清学检测
(一) 血清TGF-β1检测 采用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)，试剂盒由美国Genzyme公司提供。
(二) 血清PCⅢ、LN、HA检测 采用放免法，试剂分别由重庆肿瘤研究所、上海海军医学研究所提供。
(三) 肝炎病毒标志检测 抗-HAV-IgM、抗-HCV、HDVAg、抗-HDV、抗-HEV、采用ELISA法；HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBc-IgM、HBeAg、抗-HBe采用固相放射免疫法；HBV DNA、HCV RNA采用聚合酶链反应(PCR)法。
四、肝脏病理组织染色
(一) HE染色、网状纤维染色 采用镀银染色，由本院病理科专人在同一条件下制作。
(二) 胶原纤维染色 采用Masson s三重染色，由河北医科大学病理教研室专人同一条件下染色。
五、纤维病理图像定量分析
应用MPIAS-500多媒体彩色病理图文分析系统(同济医科大学提供软件)，分别测出阳性目标总面积、面密度、积分光密度指标，由白求恩国际和平医院病理科协助完成。
六、统计学处理
组间资料比较采用方差分析、q检验，各指标间相关分析采用直线相关分析。
结果
一、CHB、LC患者血清TGF-β1、PCⅢ、LN、HA水平
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