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非放射性DNA探针检测金黄色葡萄球菌耐甲氧西林基因 |
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CR方法对MRSA特有的mecA基因进行扩增，采用毛细管转移将DNA从琼脂糖凝胶中转移至NC膜上，酶促生物素标记寡核苷酸作为探针，与固定于NC膜上的DNA杂交，最后用生物素-链抗生物素蛋白-碱性磷酸酶显色体系显色，以及用斑点杂交等证实533bp DNA片段为MRSA mecA基因特异性产物，40株MRSA，PCR结果及Southern blot结果均阳性，20株MSSA中，3株PCR及Southern blot检出mecA基因。生物素寡核苷酸探针斑点杂交敏感度为4ng DNA量。由此可见，用特异性DNA探针与mecA基因进行核酸杂交，是鉴定MRSA比较可靠的方法，具有以下优点：1 特异性强；2 敏感性较高；3 耗时较短(与药敏法比较)且结果客观，尤其是传统方法难以确定的临界株(MCI为0.5～8mg/L)，采用核酸杂交法可以获得客观结果，为临床医师合理选用抗生素治疗葡萄球菌感染提供了依据。
作者单位：430042 重庆医科大学附属第一医院
参考文献
1 Sambrook J, Fristsch EF, Maniatis T. Molecular Cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor, N.Y 1989.
2 Franciolli M, Bille J, Glauser MP, et al. Beta-lactam resistance mechanisms
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