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干燥综合征患者唇腺组织中三种细胞因子的检测 |
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drome，SS)是一种以外分泌腺受累为主要表现的炎性、自身免疫性疾病。唾液腺大量炎性细胞浸润使腺体的结构遭到破坏，以致功能减退或丧失。炎症细胞因子是与炎症反应有关的几个细胞因子的通称，主要指肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)。越来越多的研究表明，它们普遍出现在各种感染和非感染的炎症反应中，尤其在自身免疫反应中起重要作用〔1〕。本研究采用免疫组织化学的方法对原发性SS(pSS)，继发性SS(sSS)和对照组唇腺中的细胞因子TNFα，IL-1α和IL-6的表达进行检测和分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料
26例唇腺组织标本均来自北京协和医院口腔科门诊和住院患者。共分为三组：pSS组11例，均为女性，年龄25～70岁。sSS组12例，女性9例，男性3例，年龄18～61岁，其中继发于系统性红斑狼疮者5例，继发于类风湿关节炎者4例，其他结缔组织病者3例。按文献〔2〕标准进行诊断。对照组3例，男性1例，女性2例，年龄21～40岁，其中1例为下唇外伤患者，2例为下唇粘液腺肿瘤患者。
1.2 方法
1.2.1 材料：抗细胞因子单克隆抗体分别为羊抗人TNFα，羊抗人IL-1α和羊抗人IL-6，由Technical Data出品，稀释度为1：1 000。
1.2.2 检测方法：取新鲜唇腺组织做冰冻切片(厚度为4 μm)，粘附于涂有明胶的玻片上。采用ABC法做免疫组织化学染色〔3〕。从每一种单克隆抗体染色片中随意取5个视野在光镜下观察，以细胞上出现棕色着色点者为阳性细胞，计数每100个细胞中的阳性细胞数，取平均值。
每例标本亦按常规进行HE染色，按Chisholm标准〔4〕对组织进行病理分级。
2 结果
2.1 细胞因子在唇腺组织中的表达：将各种细胞因子在唇腺中的表达大致分为3个区域：淋巴细胞浸润区、腺泡区和导管区。各区域内各种细胞因子出现的阳性百分比见表1。
表1 唇腺组织中不同部位各种细胞因子表达的阳性百分比 %
组别 病例数 IL-1 IL-6 TNF-α
腺泡 导管 浸润的淋巴细胞 腺泡 导管 浸润的淋巴细胞 腺泡 导管 浸润的淋巴细胞
pSS 11 231) 191) 271) 301) 291) 311) 462) 342) 371)
sSS 12 251) 211) 211) 371) 321) 341) 422) 312) 351)
对照组 3 0 0 0 0 0 0 0 0 8
注：1)与对照组比较P＜0.012)与对照组比较P＜0.05
在pSS和sSS组，上述3个区域均有IL-1α、IL-6和TNFα的表达，但2组间差别无显著性意义(P＞0.05)。而对照组中，除了有少许TNFα的表达外，均未见IL-1α和IL-6表达。与pSS和sSS组比较，差别具有非常显著意义(P＜0.01)。
在腺泡区，IL-1α表达的阳性百分比最低，pSS和sSS两组平均阳性百分比为24%，而TNFα则高达44%，IL-6为34%。在导管区，IL-1α的表达低于IL-6和TNFα的表达。此外，管腔中可见片状的棕色沉积物。在淋巴细胞浸润区，TNFα的表达主要集中在周边区域的淋巴细胞中。
2.2 细胞因子的表达与唇腺病理分级之间的关系：按Chisholm的分级标准，我们将所有的标本进行了病理分级。在pSS中，Ⅳ级5例，Ⅲ级4例，Ⅱ级2例。其中病理Ⅱ级的标本中，各种细胞因子出现的阳性率，IL-1α为14%，IL-6为21%，TNFα为29%。在病理Ⅲ级的标本中，IL-1α为29%，IL-6为36%，TNFα为46%。病理Ⅲ级的标本中，细胞因子出现的阳性率要高于分级为Ⅱ级的标本，但病理分级为Ⅳ级的标本中，细胞因子出现的阳性率却低于病理Ⅲ级的标本，其中IL-1α为26%，IL-6为33%，TNFα为42%。在sSS组中，病理分级为Ⅳ级的4例，Ⅲ级3例，Ⅱ级2例。同样，细胞因子表达率最高的为病理Ⅲ级的标本，其中IL-1α为26%，IL-6为39%，TNFα为43%。病理Ⅳ级的标本中，IL-1α为22%，IL-6为3上一页 [1] [2] [3] 下一页
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