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Graves病患者治疗前后血清白细胞介素12 白细胞介素13 细胞间粘附分子 |
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刘鹏鹰 何建凡 吴建龙 余怀新 罗国春 阎德文 黄晖
Graves 病(GD)是与遗传和主要组织相容性复合体(MHC)有关的刺激性T细胞(TS细胞)功能缺陷性自身免疫性疾病，但确切的病因和发病机理尚未阐明。GD主要治疗药物有硫脲类和咪唑类，目前认为它们不仅抑制甲状腺激素的合成，而且具有免疫调节作用，但作用机制仍不清楚。为此，我们对35例GD患者治疗前(治疗前组)及治疗缓解后(缓解组)和25例健康人的血清白细胞介素(IL)-12、IL-13、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)进行了观察，现报告如下。
一、对象与方法
1.对象：治疗前组：初诊GD患者35例(男12，女23)年龄19～52岁，平均29岁，有典型GD症状和体征，血清FT3、FT4增高，促甲状腺素(TSH)低于正常或正常低值。缓解组：上述病例经他巴唑或丙基硫氧嘧啶治疗4～16周，高代谢症群消失，FT3、FT4和TSH正常者。对照组：健康体检人员25名(男8，女17)，年龄18～55岁，平均28岁，无肝、肾、甲状腺等病史，FT3、FT4、TSH正常。
2.方法：空腹静脉采血，1小时内分离血清，置于-30℃冰箱储存。IL-12、IL-13、ICAM-1检测采用ELISA法，试剂盒购自海南华美公司，批号分别是005990/981020、003970/981020、006347 /Sep 14 1998。IL-12、IL-13的检测：如50μl抗体于微孔板，再加50μl标准品或待检血清，20～25℃分别孵育3小时和2小时，磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次，加抗生物素蛋白辣根过氧化物酶(HRP)反应30分钟，再洗涤3次，加100μl TMP底物溶液，孵育30分钟，加100μl终止液终止反应，以波长450nm测定吸收值，根据标准曲线，计算样品含量。ICAM-1的检测：以1:100比例稀释样品，加25μl构建标准品或待检血清到微孔板中，再加75μl结合可溶性ICAM-1试剂，20～25℃下在(150±10)rpm旋转器中孵育2小时，弃上清液，洗涤3次，加100μl OPD底物，孵育30分钟，加50μl终止液终止反应，以波长490nm测定吸收值，根据标准曲线，计算样品含量。血清FT3、FT4、TSH采用放免法测定，试剂盒购自北方生物技术研究所。
统计学分析：治疗前组、缓解组和对照组IL-12、IL-13、ICAM-1比较采用t检验，IL-12、IL-13、ICAM-1与FT3、FT4、TSH的关系采用直线相关分析。
二、结果
GD治疗前后及对照组血清IL-12、IL-13、ICAM-1和FT3、FT4水平见表1。IL-12治疗前组显 著高于对 照组，P＜0.05，缓解组与对照组、治疗前组与缓解组均无差异。IL-13 三组间均无 差异。ICAM-1缓解组显著低于治疗前组，P＜0.05，缓解组与对照组、治疗前组与对照组无差异。IL-12、ICAM-1与FT3、FT4呈正相关，与TSH无相关，IL-13与FT3、FT4、TSH无相关。
表1 三组血清IL-12、IL-13、ICAM-1和FT3、FT4水平(±s)
组别 IL-12 IL-13 ICAM-1 FT3 FT4
(pg/ml) (pg/ml) (ng/ml) (pmol/L) (pmol/L)
治疗前组 5.94±2.96 9.30±4.75 4.66±2.41 31.35±12.21 53.88±20.34
缓解组 5.27±3.13 10.16±5.03 3.63±1.89 5.87±1.39 16.76±5.39
对照组 4.10±2.27 9.47±4.02 4.01±2.11 6.01±1.74 17.03±6.27
三、讨论
IL-12是由巨噬细胞、B细胞衍生的细胞因子，它诱导T细胞、NK细胞产生γ干扰素，增强NK细胞、T细胞介导的细胞毒活性，促进辅助性T细胞1(Th1型细胞)反应，作用快、作用浓度低，作用对象有相对特异性。本研究在GD治疗前IL-12处于高水平，反映T细胞、NK细胞功能[1] [2] 下一页
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