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载脂蛋白E基因多态性对血脂及冠心病 颈动脉粥样硬化的影响 |
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and LDL-C levels in the following order: ε2／2+ε2／3<ε3／3<ε3／4+ε4／4(P<0.01). In women, there were a similar trend but not statistically significant (P>0.05). The carotid artery intima-media thickness and frequence of multiatherosclerotic plaques were significantly higher in male CHD cases with ε4 allel (P<0.01 and 0.04), and still did not change the effect of ε4 on intima-media thickness after adjusting for LDL-C levels.Conclusions Apolipoprotein E gene polymorphism affects serum TC and LDL-C levels in Chinese people. Apolipoprotein E genotypes affect severity of carotid artery atherosclerotic lesions, but the effect may not be mediated entirely by changes of serum cholesterol. ε4 allel is a risk factor.
【Key words】 apolipoproteins E gene coronary disease
冠心病（CHD）是由遗传因素及环境因素共同决定的疾病。血脂代谢异常尤其是低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）增高与CHD的关系最为密切。载脂蛋白E（apoE）是多种脂蛋白的重要结构及功能蛋白质，具有三种异构体（E2，E3，E4），分别由第19号染色体上的三种等位基因（ε2，ε3，ε4）编码。一些研究表明，apoE基因多态性是决定血脂水平进而影响CHD及动脉粥样硬化病变发生、发展的遗传因素之一，但存在明显的种族差异，结论尚不统一。本研究的目的在于探讨apoE基因多态性对中国人血脂水平的影响及与CHD发病及颈动脉粥样硬化程度的关系。
资料与方法
一、研究对象
1.CHD组：共96例于1995年10月～1996年6月收住我院心内科治疗的冠心病患者，男74例，女22例；年龄42～70岁（平均59.3岁）。均符合1979年世界卫生组织（WHO）的诊断标准。
2.对照组：131例，男102例，女29例；年龄40～68岁（平均58.1岁）。无冠心病的症状、体征，常规心电图及超声心动图检查无异常。次极量心电图运动负荷试验（Bruce方案）阴性。
以上研究对象均除外家族性高胆固醇血症；无糖尿病及肾脏、甲状腺功能异常；近3个月未用调血脂药。
二、血脂测定
血标本采集后，于30分钟内分离血清，置-70℃冻存，1个月内测定血脂。血脂测定方法： （1）甘油三酯（TG）：磷酸甘油氧化酶法及Trinder反应显色。 （2）总胆固醇（TC）：胆固醇氧化酶法。（3）高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：磷钨酸镁沉淀法及酶法。（4）LDL-C：采用Friedewald公式计算：LDL-C=TC-HDL-C-1/5TG（式中各项指标的单位均为mg/dl，TG<400mg/dl时此公式适用。以上测定均使用同一台日本产AU-5031 Olympus全自动生化分析仪在本实验室最佳条件下进行，质控合格 。以上血脂指标的批间变异系数分别为：TC≤2.6%，TG≤2.2%，HDL-C≤5.3%）。
三、apoE基因型分析
提取基因组DNA，采用聚合酶链反应（PCR）扩增apoE的基因片段，引物序列参照文献［1］。PCR反应体系包括：1μg基因组DNA，200μmol/L的dNTPs,1pmol/μl的引物，10x 反应缓冲液 (含Mg2+)，10％二甲基亚砜及1u TaqDNA聚合酶。总体积为30μl，以30μl液体石蜡上一页 [1] [2] [3] 下一页
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