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新疆地区多民族丙型肝炎病毒血清学分型与基因分型的探讨 |
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张希成 王云 谭欣成 刘志华
表1 不同民族感染的HCV基因型
族 别 可分型数 基 因 型
Ⅰ、Ⅱ型(%) Ⅲ、Ⅳ型(%) Ⅰ、Ⅱ/Ⅲ、Ⅳ
混合型
汉族 40 33(82.5) 6(15.0) 1(2.5)
维吾尔族 40 21(52.5) 14(35.0) 5(12.5)
哈萨克族 14 12(85.7) 1(7.1) 1(7.1)
回族 8 4(50.0) 3(37.5) 1(12.5)
蒙古族 3 2(66.7) 1(33.3) 0
合计 105 72(68.6) 25(23.8) 8(7.6)
表2 HCV血清型与基因型的关系
血清型 例数 基 因 型
Ⅰ、Ⅱ型 Ⅲ、Ⅳ型 Ⅰ、Ⅱ/Ⅲ、Ⅳ混合型
1 38 35 1 2
2 18 7 10 1
1+2 18 10 5 3
合计 74 52 16 6
目前，根据丙型肝炎病毒(HCV)核苷酸序列的差异，将HCV分为四种不同的基因型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)［1，2］。杜绍财等［3］根据中国HCV的感染情况，设计了一项简便酶切分型方法，证实中国以Ⅱ型为主，其次为Ⅲ型。1995年陈志等［4］根据Ⅰ、Ⅱ型和Ⅲ、Ⅳ型HCV核心区特异性核酸序列，选用HCV核心区两个型特异性合成多肽做为包被抗原，将血清中抗-HCV分为1、2型。Machida等［5］研究结果表明：血清1型为基因Ⅰ、Ⅱ型，血清2型为基因Ⅲ、Ⅳ型。我们用HCV血清抗体分型方法及HaeⅢ酶切基因分型方法对新疆地区不同民族HCV感染者进行分型对比研究，现将结果报告如下。
材料和方法
一、血清标本来源
1996年4～8月从新疆乌鲁木齐、阿克苏、库尔勒、伊犁、阿尔泰和克拉玛依等地防疫站及门诊患者采集汉族、维吾尔族、哈萨克族、回族和蒙古族抗-HCV阳性血清共141例，男95例，女46例，年龄4～73岁。
二、主要试剂
抗-HCV的检测试剂盒，由上海科华生物工程公司提供，HCV RNA PCR试剂盒及HCV血清分型试剂盒由北京医科大学肝炎试剂中心提供。
三、方法
(一) HCV基因分型 血清标本经PT-PCR检测，有105份为HCV RNA阳性。取上述HCV RNA阳性产物10μl与Hae Ⅲ 37℃消化1小时，电泳后根据扩增产物能否被内切酶HaeⅢ切开，判断HCV基因型［6］。基因Ⅰ/Ⅱ型，无HaeⅢ酶切位点可见145bp处一条扩增带。Ⅲ，Ⅳ型被切成89和56bp两个片段。混合型可见145bp、89bp和56bp三条扩增带。
(二) HCV血清型分型 按说明书操作。
结 果
一、血清学分型结果
141例抗-HCV阳性血清标本血清学分型有100例阳性，可分型率为70.9%(100/141)，其中血清1型50%(50/100)，血清2型23%(23/100)，血清1、2混合型27%(27/100)。各民族间感染的HCV血清型间比较无统计学差别。
二、基因型分型结果
141型抗-HCV阳性标本中，HCV RNA阳性者105例。对其105例HCV RNA阳性进行HaeⅢ酶切基因分型，其中Ⅰ、Ⅱ型占68.6%(72/105)，Ⅲ、Ⅳ型占23.8%(25/105)，Ⅰ、Ⅱ/Ⅲ、Ⅳ混合型占7.6%(8/105)。不同民族HCV感染者基因分型结果见表1。
三、HCV血清型与基因型的关系
不同民族100例HCV血清分型阳性标本，有74例HCV RNA阳性，对其74例进行酶切分型，重点对两种分型方法的结果，加以比较研究，血清分型与基因分型结果见表2。
讨 论
近几年来，无论是HCV核心区抗体分型(血清型)，还是HCV基因分型，都引起学者们的广泛重视。北京、上海、广州、西安等地都先后对本地区HCV感染者的HCV基因型进行了研究，但对新疆地区不同民族HCV分型研究甚少，为此，我们对新疆地区不同民族141例HCV感染者血清标本进行分型，可分型率70.9%(100/141)汉、维、哈、回、蒙等新疆地区的五个主要民族均以血清1型为主，其次为1、2混合型，血清2型感染率较低。
根据HCV5&pri[1] [2] 下一页
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