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人胚胎下丘脑褪黑素受体鉴定及其生物学特性 |
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赵瑛 邵福源 何淑芬 彭澍勋
【摘要】 目的 为证实人胚胎下丘脑是否存在褪黑素受体(MR)，以及GTPγS和电解质对MR的影响，以阐明褪黑素(M)生物学特性及对内分泌系统作用的机制。方法 应用放射配体结合法检测人胚胎下丘脑〔125I〕M特异结合。结果 1.人胚胎下丘脑〔125I〕M特异结合的Scatchard分析：最大结合容量(Bmax)为(1.15±0.32)fmol/mg蛋白质；平衡解离常数(Kd)为(36±8)pmol/L；2.动力学分析表明为可逆性结合；3.特异性分析表明对M高度特异性；4.10μmol/L和50μmol/L GTPγS使〔125I〕M特异结合降低，且有剂量依赖性。结论 实验结果表明人胚胎下丘脑存在〔125I〕M特异结合位点。GTPγS对〔125I〕M特异结合有明显抑制作用，提示MR属于G蛋白系统。
【关键词】 褪黑素受体 下丘脑 胚胎
Identification and characteristics of melatonin receptor in human embryonic hypothalamus
ZHAO Ying,SHAO Fuyuan,Celia S PANG,et al.
Department of Neurology,Chang Zheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai,200003
【Abstract】 Objective To verify whether there exists melatonin receptor in human embryonic hypothalamus. Methods Specific binding of melatonin to embryonic hypothalamus was measured by radioligand binding assay. Results The maximum binding capacity (Bmax) was (1.15±0.32)fmol/mg protein and equilibrium dissociation constant (Kd) was (36±8)pmol/L. GTPγS dose-dependently inhibited the binding. Conclusion The results demonstrate the presence of specific binding of melatonin in human embryonic hypothalamus. GTPγS inhibits the binding, indicating that putative melatonin receptor is coupled to G-proteins.
【Key words】 Melatonin receptor Hypothalamus Embryo
(Chin J Endocrinol Metab, 1999,15:149-152)
褪黑素(melatonin, M)是松果腺分泌的主要激素。近年来的研究表明，M对机体有多方面的调节作用〔1-3〕，其中，M对下丘脑促激素释放素的调节作用是M重要生理功能之一，一般认为，M对下丘脑-垂体-性腺、肾上腺、甲状腺轴均有抑制作用〔4，5〕，但研究结果尚不一致，其中，M对生殖系统的作用是比较明确的，将M注入啮齿类动物的下丘脑后，可刺激下丘脑促性腺素释放素的分泌，引起黄体生成素和卵泡刺激素的分泌发生变化；在下丘脑已测得高浓度的M，说明下丘脑是M作用的主要部位及靶组织。已有研究表明鸟类及鼠类脑组织存在褪黑素受体(MR)〔6，7〕，进一步支持M作用下丘脑-垂体系统的学说，但人类脑组织，尤其下丘脑组织是否存在MR尚无报告。为此，我们以中期引产胎儿下丘脑为材料，证实了人胚胎下丘脑存在MR，现报告如下。
材料和方法
一、对象
中期引产胎儿(4～6个月)10个。
二、材料
1.〔125I〕褪黑素(〔125I〕M)2 200Ci/mmol，美国Dupont公司产品。GTPγS，美国Sigm[1] [2] 下一页
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