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近交系NJS小鼠血浆内皮素与血清胆固醇的关系 |
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董政军 孙敬方 潘震寰 罗南萍 尹秋霞
血管内皮素(endothelin, ET)是由血管内皮细胞产生的一种缩血管肽。ET具有强大的缩血管效应，不仅可影响心血管系统的血流动力学，而且还具有促进血管平滑肌细胞增殖作用。近交系NJS小鼠是通过连续全同胞交配与定向选育的近交系动物，呈自发性高胆固醇血症状态，8～10月龄小鼠均有主动脉粥样硬化病变。我们测定近交系NJS小鼠的血浆ET水平，并分析ET与血清胆固醇(Ch)的关系，探讨其发生动脉粥样硬化的机制。
一、材料和方法
1.材料：近交系NJS小鼠为实验组，近交系KM及C57BL/6J小鼠为对照组，3～4月龄，每组16只，雌雄各半，均由南京军区医学动物实验中心提供，其中NJS小鼠取自近交F22基础群。小鼠于符合GB14922-94规定的清洁级标准和GB/T19925-94规定的亚屏障系统内饲养。从小鼠眶静脉窦毛细血管采血0.15ml，室温静置30分钟，再于4℃静置60分钟，7000rpm离心10分钟，收集上层血清待测。再摘眼球取血1.5 ml，置于预冷的含有EDTA-Na2和抑肽酶的塑料试管中，充分混匀后，置4℃以3000rpm离心10分钟，分离收集血浆，置于-30℃保存待测。
2.方法：血浆ET测定，采用放射免疫方法，以均相竞争法直接检测。ET放射免疫药盒购自中国人民解放军总医院，测定仪器为国营262工厂生产的γ计数器。血清Ch含量以日立7150型血液自动生化分析仪测定，测定方法为单一酶试剂比色法，试剂由意大利Sclavo公司生产。
3.统计方法：数据以平均数和标准差()表示，采用直线相关分析、方差分析和组间资料q检验进行统计分析。
二、结果
血浆ET值与血清Ch水平的关系见附表。各组雌雄小鼠间的ET值无明显差异，NJS小鼠ET水平显著高于对照组(P＜0.01)。各组雄性小鼠Ch显著高于雌性小鼠(P＜0.05，P＜0.01)。NJS小鼠Ch显著高于其他各组(P＜0.01)，KM及C57BL/6J小鼠组间无明显差异。血浆ET值随血清Ch浓度增加而增高，两者呈正相关(r=0.752,P＜0.01)。
附表 小鼠血浆ET和血清Ch水平
组别 例数 ET(ng/L) Ch(mmol/L)
NJS 16 67.56±6.09# 5.65±0.71#
雄性 8 69.13±7.68 6.39±0.40**
雌性 8 65.98±7.35 4.91±0.54
KM 16 49.84±10.71 2.22±1.07
雄性 8 53.43±9.52 2.58±0.71*
雌性 8 46.24±9.78 1.86±0.73
C57BL/6J 16 54.14±8.61 2.50±0.63
雄性 8 56.78±7.42 2.84±0.35**
雌性 8 51.49±7.52 2.15±0.39
注：组间比较，#P＜0.01；组内雄性与雌性比较，*P＜0.05；组内雄性与雌性比较，**P＜0.01
三、讨论
本文结果表明，NJS小鼠血清Ch含量及血浆ET水平均较其他品系小鼠显著增高。可以推测，NJS小鼠的血脂代谢紊乱能引起血液流变学异常而致组织缺血缺氧，造成血管壁机械性损伤及微循环灌流不足，促使血管内皮细胞合成及分泌ET增加。本文结果还显示NJS小鼠的血浆ET水平随血清Ch含量增加而增高，表明在高胆固醇血症状态下，血浆ET增高可能对该品系小鼠动脉粥样硬化的发生具有促进作用，提示该品系小鼠动脉粥样硬化病变的发生与高脂血症及高血浆ET水平有关。
全军九五医药卫生科研课题基金资助
作者单位：250031 中国人民解放军济南军区总医院(董政军、罗南萍、尹秋霞)；中国人民解放军南京军区总医院(孙敬方、潘震寰)
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