的对角线处放入,记录小鼠在平台所在象限的时间即穿越有效区的时间和120 s内穿越平台的次数。
1.6 5HT和DA的检测
将小鼠迅速断头、取脑,放入预先冰冷的生理盐水中,去除脑膜和血管,分出海马,称重后加入预先冰冷的加入少量酸化正丁醇的玻璃匀浆器中,研磨制成匀浆,4℃ 3 000 r/min离心15 min,取上清,用荧光分光光度法测5HT和DA。
1.7 HE染色
水合氯醛麻醉后,迅速剖开胸腔暴露心脏,剪开右心耳,夹持心尖,自心尖左侧剪开左心室,将大隐静脉穿刺针经左心室插入升主动脉,灌注生理盐水,待血色变淡后,继以4%多聚甲醛(4℃)灌注固定,直至动物呈僵硬状态。原位静置1 h后取脑,用上述固定液后固定。取视交叉至乳头体组织,常规石蜡包埋,冠状切片,厚度8 μm,进行常规HE染色,程序如下:石蜡切片常规脱蜡下行至蒸馏水中待染;切片置苏木素染液5 min,自来水洗去多余的染料;切片放入盐酸酒精中数秒钟,水洗;切片入氨水溶液中至细胞核变蓝;将返蓝的切片充分水洗,去掉碱性物质,然后入1%伊红水溶液中5 min,洗去多余的伊红;显微镜下观察核浆染色对比清晰后梯度酒精脱水、封片。光镜下观察病理形态学变化。
1.8 统计学处理
数据表达采用x±s,采用t检验比较分析。应用SPSS11.0软件进行统计学处理。
2 结果
2.1 bFGF对拟VD小鼠跳台实验的影响
与正常组比较,假手术组小鼠学习训练和记忆测试中的各项指标相近,组间比较无显著性差异(P>0.05);模型组小鼠学习训练中反应期延长(P<0.01),错误次数增加(P<0.01);记忆测试中潜伏期缩短(P<0.01),错误次数增加(P<0.01)。与模型组相比,bFGF组小鼠学习训练中反应期明显缩短(P<0.01),错误次数减少(P<0.01);记忆测试的潜伏期延长(P<0.01),错误次数明显减少(P<0.01)。见表1。表1 bFGF对拟VD小鼠跳台实验的影响(略)
2.2 bFGF对拟VD小鼠避暗实验的影响
与正常组比较,假手术组小鼠潜伏期,错误次数无显著性差异(P>0.05);学习训练中,与正常组比较,模型组小鼠潜伏期延长(P<0.01),错误次数明显增加(P<0.01);与模型组比较,bFGF组潜伏期缩短(P<0.01),错误次数明显减少(P<0.01)。在记忆测试中,与正常组比较,模型组潜伏期明显缩短、错误次数明显增多(P<0.01);与模型组比较,bFGF组潜伏期明显延长,错误次数明显减少(P<0.01)。见表2。表2 bFGF对拟VD小鼠避暗实验的影响(略)
2.3 bFGF对拟VD小鼠Morris水迷宫的影响
定位航行实验:各组小鼠随着训练天数的增加,寻找平台的潜伏期明显缩短。但与正常组比较,假手术组小鼠寻找平台的潜伏期无显著性差异(P>0.05),模型组小鼠寻找平台的潜伏期显著延长(P<0.05,P<0.01);与模型组小鼠比较,bFGF组小鼠寻找平台的潜伏期显著缩短(P<0.01)。空间探索实验:与正常组比较,假手术组小鼠穿越有效区时间以及穿越平台的次数无显著性差异(P>0.05),模型组小鼠穿越有效区时间明显缩短(P<0.01),穿越平台的次数减少(P<0.01);与模型组小鼠比较,bFGF组小鼠穿越有效区的时间延长(P<0.05),穿过平台的次数增多(P<0.01)。见表3。表3 bFGF对拟VD小鼠寻找平台潜伏期及空间探索实验的影响(略)
2.4 bFGF对拟VD小鼠DA和5HT的影响
与正常组比较,假手术组小鼠海马组织5HT和DA含量无显著性差异(P>0.05),模型组小鼠脑海马组织5HT和DA含量明显低于正常组(P<0.01);bFGF组5HT和DA含量均高于模型组(P<0.05,P<0.01),见表4。表4 bFGF对拟VD小鼠海马内单胺类神经递质的影响(略)
2.5 海马组织CA1区HE染色观察
正常组:小鼠海马 CA1 区锥体细胞核大而圆,核仁明显,细
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