131例EDTA K2诱导血小板聚集的原因分析

　　【摘要】 目的：探讨EDTA-K2诱导血小板聚集的原因。方法：采用Sysmex KX-21血液分析仪和手工显微镜法，分别检测了131例仪器法出现血小板聚集报警的住院患者的标本，并对二者结果进行了比较。结果：有血小板聚集报警的某些血液性疾病(缺铁性贫血、再生障碍性贫血、特发性血小板减少性紫癜)和冠心病仪器法计数血小板与显微镜法比较差异有统计学意义(P<0.05)，而其他疾病两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：正确、合理地使用EDTA-K2抗凝血做全血细胞计数，遇有血小板聚集报警的标本，须用显微镜法复核，既可起到互补作用，也有助于提高检验质量，避免假性血小板减少的发生。

　　【关键词】 EDTA-K2;诱导;血小板聚集

　　全血细胞计数(CBC)是临床检查最常规最基本的项目，对血小板计数准确性的问题也一直受到人们的广泛关注和讨论，尤其是乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝剂诱导血小板聚集导致假性血小板减少(EDTA-PTCT)的相关报道较多，但其机制尚待进一步研究。有专家认为，血小板计数准确性可能与EDTA抗凝血中获得性抗体的存在导致血小板聚集有关[1]。我们在应用血液分析仪过程中，对血小板计数出现聚集报警的标本采用不同的方法进行对比分析，现将结果报道如下。

　　1 对象与方法

　　1.1 检测对象 为2006年8月至2007年4月来我院住院部就诊的患者常规检查，出现血小板聚集报警的病例131例，男83例，女48例，年龄2～87岁，平均年龄51.3岁。

　　1.2 仪器和试剂 采用Sysmex KX-21血液分析仪(简称KX-21，定期参加卫生部临床检验中心室间质控)，试剂为进口配套试剂，室内质控物采用Sysmex公司原装配套全血质控物。显微镜采用CHK型Olympus显微镜(日本欧林巴斯光学工业株式会社)。血小板稀释液(草酸铵法稀释液)按《全国临床检验操作规程》第2版配制，于4℃冰箱保存。瑞吉染色液(自制)。

　　1.3 KX-21仪器和显微镜血小板计数 采集住院患者新鲜全血2mL于含EDTA-K2的真空采血管(山东威高集团医用高分子公司)内，充分混匀，先在KX-21上检测血小板。同时，在采血后未抗凝前用显微镜法(草酸铵法血小板稀释液0.38mL加20μL血液，混匀、充液、镜检)计数血小板，每份标本计数2次，取平均值与仪器法结果比较。仪器的血小板计数和密度评价均符合要求。

　　1.4 血涂片观察 以上所有抗凝血标本均推制血膜片，血膜片应呈舌状，头、体、尾清晰可分。瑞吉染色液染色，在油镜(×100倍)下观察血小板的大小、形态、有无聚集和细胞碎片。

　　1.5 统计学方法 实验数据以均数±标准差(x±s)表示，采用t检验。

　　2 结果

　　2.1 两种方法精密度测定结果 仪器和显微镜血小板计数的精密度均在设定的范围内，变异系数(CV)<4.0%，但仪器法计数血小板的CV均低于显微镜计数法，见表1。表1 仪器和显微镜血小板计数精密度测定结果

　　2.2 血涂片镜检情况 在131例血小板聚集报警提示中，经血涂片镜检证实存在血小板聚集的29例，占22%。

　　2.3 两种方法血小板计数结果 131例被检患者中，某些血液性疾病(如缺铁性贫血、再生障碍性贫血、特发性血小板减少性紫癜)和冠心病，仪器法计数血小板与显微镜法比较差异有统计学意义(P<0.05);急性白血病和其他疾病两种方法比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。表2 KX-21仪器和显微镜血小板计数结果比较

　　3 讨论

　　在日常工作中，导致血小板聚集的因素较多，其中由于抗凝剂导致血小板聚集和采血不当、混匀不及时等造成的血小板聚集比较常见[2]。在7例白血病、8例原发性血小板增多症和46例其他疾病患者中，KX-21上有不同程度的异常报警提示，通过血涂片镜检证实，其KX-21法和显微镜计数法比较差异无统计学意义(P>0.05)。在21例缺铁性贫血患者中，平均红细胞体积(MCV)均<72fL，且KX-21均出现了异常报警提示，经血涂片观察显示红细胞呈大小不均、小红细胞及红细胞碎片，1例出现血小板聚集，与闭雄杰[3]的报道相符，同时在缺铁性贫血患者的循环血液中由于小红细胞低色素表现，导致了KX-21计数血小板高于标本的实际值。在8例再生障碍性贫血和13例特发性血小板减少性紫癜患者中，经血涂片观察可见血小板聚集和大血小板，由于KX-21计数血小板不能识别血小板聚集和大血小板的体积，只能提示血小

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