1 资料与方法
1.1 材料 选取西安交通大学医学院第一附属医院1994～1999年经根治性肺癌切除、术后病理证实的NSCLC石蜡包埋组织标本43例，其中男性35例，女性8例，男女之比为4.38∶1;年龄32～77岁，平均58.7岁;生存期最长的为72个月，且继续存活，最短于术后3个月死亡，死亡原因均系肺癌及相关疾病或并发症。所有病例术前均未行放疗和化疗，无其他疾病及并发症。病理类型：腺癌26例，鳞癌17例;分化程度：Ⅰ、Ⅱ级24例，Ⅲ级19例。临床分期(pTNM)：Ⅰ期10例，Ⅱ期17例，Ⅲ期16例。29例伴有区域淋巴结转移。正常对照取7例正常肺组织，男性5例，女性2例。
1.2 试剂及方法 αcat和βcat单克隆抗体购于北京中山生物技术有限公司，PV6000PicTureTM通用型试剂盒为美国Zymed公司产品。本实验采用免疫组化PicTureTM通用型二歩法，石蜡标本常规切片，脱蜡至水，30mL/L甲醇双氧水阻断内源性过氧化物酶活性，微波炉修复抗原，每张切片滴加1∶70鼠抗人αcat或βcat第一抗体80μL，置湿盒中室温下孵育120min，PBS液洗涤后滴加即用型PV6000 PicTureTM通用型试剂，室温下孵育30min，DAB液中显色，苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明后封片。阳性对照采用已知的表达αcat、βcat的正常支气管黏膜切片，空白对照采用PBS代替一抗。
1.3 结果判定标准 免疫组化阳性反应为棕黄色或黄色细颗粒状着色。αcat和βcat正常染色均定位于细胞膜，表现为细胞膜呈均匀线性棕黄色染色，无胞质及胞核染色(图1)。异常染色表现为细胞膜染色减少和(或)细胞质、胞核染色(图1)。依阳性细胞百分比和染色分布综合判断分析。每例切片在400倍光镜下随机找5～10个视野，数100～200个细胞，共1000个癌细胞，记录阳性细胞的百分数和染色特征。如果≥90%的肿瘤细胞染色为正常染色时为正常表达;如果正常染色的肿瘤细胞数<90%为异常表达[3]。
1.4 统计学处理 所有统计学分析采用SPSS 10.0统计软件包完成。αcat和βcat的表达采用卡方检验和Fisher精确概率法;组间相关性用Kendalls taub秩相关检验;各因素对生存的影响采用LogRank检验，生存期按KaplanMeier方法制作累计生存曲线;影响预后的多因素分析采用Cox比例风险模型。结果均以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 αcat和βcat在正常肺组织及NSCLC中的表达 αcat及βcat在正常肺组织中无异常表达。43例NSCLC中αcat及βcat异常表达率分别为72.1%(31/43)和65.1%(28/43)。两种蛋白异常表达率在正常肺组织和NSCLC间经统计有统计学意义(P<0.05，Fisher精确概率法)。
2.2 αcat和βcat在NSCLC中的表达与临床参数的关系 在病理分级Ⅰ、Ⅱ级分组中αcat和βcat的异常表达率分别为58.3%和50.0%，Ⅲ级分组中αcat和βcat的异常表达率分别为89.5%和84.2%，不同的病理分级分组间两种蛋白的异常表达率均有显著性差异。αcat和βcat在伴有区域淋巴结转移组的异常表达率明显高于无淋巴结转移组(表1)。表1 αcat和βcat在NSCLC中的表达与临床参数的关系
2.3 αcat和βcat的表达与NSCLC预后的关系 αcat正常表达者和异常表达者的中位生存时间分别为35个月和19个月，结合Kaplanmeier生存曲线可以看出αcat异常表达患者生存期明显缩短(LogRank检验P=0.0189，图2);βcat正常表达者和异常表达者的中位生存时间分别为35个月和16个月，βcat异常表达患者生存期明显缩短(P=0.0265，图3)。进一步行Cox比例风险模型分析，表明βcat的表达水平具有独立的预后意义(P=0.004，相对危险度RR=0.330)。
2.4 αcat和βcat在NSCLC中表达的相关性 43例NSCLC中，有11例同时正常表达αcat和βcat，αcat和βcat表达具有明显的正相关性(r=0.741, P<0.01)。
3 讨 论
Ecadcat复合体是细胞间黏附和上皮组织整合的主要递质。αcat一端与βcat或γcat结合，另一端与肌动蛋白细胞骨架结合，将由Ecad传
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