变化,表明Pae对HT29细胞周期分布的影响主要是阻滞细胞周期中S期向G2/M期的转变过程,减少有丝分裂,并引起细胞凋亡。证实Pae 作用于HT29细胞的作用机制与诱导该细胞株凋亡及影响其细胞周期分布有关。
细胞凋亡是多基因调控的程序化过程。通过研究其分子调控机制,将对有计划地诱导肿瘤细胞凋亡产生重要的指导作用[7]。与细胞凋亡相关的基因大致有bcl2家族、p53、Fas、cmyc、kras等,其中bcl2是凋亡调控的中心环节。体外实验表明,去除了生长因子后, 正常细胞便逐渐转向凋亡;而当bcl2过度表达时,这一凋亡现象便被抑制[8]。由此可见,bcl2可通过抑制凋亡延长细胞寿命,产生细胞过度增殖和堆积,在肿瘤发生中起始动作用。bax基因是近年来新发现的一种凋亡促进基因,属bcl2同一家族[9]。bax基因的作用与bcl2相反,其单体以及bax/bax形式的同源二聚体均有促凋亡作用。bax又可与bcl2形成异源二聚体,抑制后者的功能促进凋亡。近期研究表明,bcl2家族中促凋亡和抗凋亡蛋白之间的平衡在调节促凋亡因子cmyc从线粒体的释放起着重要的作用[10]。bcl2/bax两蛋白之间的比例是细胞凋亡发生与否的关键因素[11]。本实验发现,Pae能明显下调大肠癌HT29细胞bcl2基因的表达,而bax在Pae作用后与对照组相比表达率无明显差异,故可认为经Pae作用后是通过bcl2/bax比例的下降,从而诱导大肠癌细胞的凋亡。
综上所述,本实验研究发现中药丹皮酚在一定的浓度范围内能显著下调人大肠癌HT29细胞bcl2/bax的比例,因此,丹皮酚的抑瘤机制之一可能是通过作用于bcl2和bax基因来诱导肿瘤细胞的凋亡。
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