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获得性血友病A动物模型的建立及应用评价 |
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sp;was infused into rabbits as control.Results Animal experiments showed that the patient's plasma markedly prolonged rabbits plasma aPTT in a timedependent fashion; while normal human plasma did not interfere with rabbits aPTT.Conclusion The method can set up the rabbit animal model of acquired haemophilia A, which provide the animal model of for further investigate the new drug treatment of acquired haemophilia A .
Key words: Acquired haemophilia A; Animal Model
获得性血友病A是一种少见的出血性疾病，因循环中产生抗FⅧ:C抗体所致。人群发病率约0.02～0.1/10万·年-1。该病出血症状重，对常规的FⅧ替代治疗反应差，常危及患者生命，大约16％～22％的获得性血友病A患者死于严重出血[1]。目前国际上对获得性血友病A的治疗尚无统一确切的治疗方案。建立获得性血友病A动物模型，从而进一步寻求新的有效药物治疗，是提高获得性血友病A患者生存率的关键。
1 材料与方法
1.1 实验材料 活化部分凝血活酶时间（aPTT）测定试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司；获得性血友病A患者血浆由中南大学湘雅二医院血液科提供；实验用健康新西兰兔由中南大学湘雅二医院实验动物中心提供。
1.2 获得性血友病A动物模型的制备 选取健康新西兰兔16只，随机分为实验组及对照组各8只，每只体重约1.5 kg。在室温18～25℃下、不锈钢笼内分笼饲养，对照组及实验组给予正常饮食，未做任何特殊处理。1周后，以2％戊巴比妥（1.5 ml/kg）耳缘静脉麻醉，然后分离兔左侧股静脉并暴露作注射用。将获得性血友病A患者（中南大学湘雅二医院血液科确诊）血浆按2 ml/kg兔体重静脉注射入实验组兔；对照组兔静脉注射等量正常人血浆，分别于注射血浆前30 min及注射血浆后30 min、60 min、90 min、120 min时间点耳缘静脉抽血，以3.8％1∶9枸橼酸钠抗凝，抗凝血3 000 r/m离心后分离血浆。
1.3 aPTT测定 活化部分凝血活酶时间（aPTT）是目前推荐应用的内源性凝血系统的筛选试验[2]。参照试剂盒说明，取0.1 ml兔血浆，然后加入aPTT试剂0.1 ml，混合后37℃ 温浴2 min，再加入37℃预温的0.025 M氯化钙0.1 ml混匀后立即启动秒表测定各时间点aPTT值，每一时间点aPTT重复两次，结果取均值。
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