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直接凝血酶抑制物的测定及其临床意义

g DTIs with a plasma diluted thrombin time is with high specificity and sensitivity,and it is a valuable index for laboratory monitor of anticoagulant and antithrombotic treatment.

    Key words:  Thrombin Inhibitor;  Diluted thrombin time;  Antithrombotic treatment

    凝血酶的形成是凝血、纤溶系统启动的核心,在出血和血栓形成中起着重要作用,因此对抗凝血酶活性的检测有着较重要的临床价值。既往研究显示,用活化部分凝血活酶时间(aPTT)、凝血酶凝固时间(TT)方法检测抗凝血酶活性受到较多因素影响;如狼疮抗凝物、类肝素类物质以及纤维蛋白原含量等[1]。本文介绍用稀释血浆凝血酶时间法(稀释纠正法)测定直接凝血酶抑制物(DTIs),并对应用抗凝血酶药物阿加曲班(argatroban)肝素治疗、aPTT延长、纤维蛋白降解产物D二聚体(DD)增高、纤维蛋白原含量异常等临床病例进行了DTIs检测。

    1  资料与方法

    1.1  研究对象  健康正常人混合血浆,取凝血相关检测正常者22份乏血小板血浆(PPP)混合,8只家兔混合PPP分装-40℃保存待测。实验室检查凝血酶时间(TT)延长受检者86例,中位年龄48.8(20~76)岁,均为我院门诊及住院患者,其中未明原因出血患者24例(临床多表现为皮肤黏膜出血、血尿、牙龈出血),急性白血病(AL)42例,下肢静脉血栓形成(DTV)抗栓治疗组患者20例。

    1.2  试剂  阿加曲班(argatroban,达贝)天津药物研究院药业有限公司产品,NO:07.10.05。凝血酶、活化部分凝血活酶时间(aPTT)等试剂由DADE BEHRING公司提供。

    1.3  仪器   CA7000(日本sysmex)全自动血凝仪。

    1.4  方法  取凝血酶凝固时间(TT)延长之PPP用正常混合PPP做1∶4稀释,取稀释后血浆上机检测TT、aPTT、蕲蛇酶时间、纤维蛋白原(Fbg)、    D二聚体(DD)、抗凝血酶活性(AT:A)。

    1.5  统计学处理  SPSS 16.0软件t检验,P<0.05为差异有显著意义。

    2  结    果

    2.1  DTIs 标准曲线制备  将阿加曲班用正常混合血浆稀释成终浓度为8.0、16.0、31.25、62.5、125、250×10-3μg/ml血浆,同时以生理盐水为零点对照,并将凝血酶时间调整至使0浓度样本凝固时间为10.0±1.0 s,上机检测TT、aPTT。结果显示TT与aPTT与阿加曲班浓度有良好的相关性,且TT较aPTT反应敏感。见图1

    2.2  家兔混合血浆DTIs试验   TT延长家兔

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