大蒜素对胃上皮细胞Cx37 Cx43 mRNA表达及细胞间隙连接通讯功能的影响

    2.1  细胞间隙连接通讯功能的变化  对照组MGC-803细胞间隙连接通讯功能较差，荧光染料只出现在划痕旁的单列细胞内，没有细胞间染料传输的现象。加大蒜素后荧光染料不仅出现在划痕附近的细胞内，而且在划痕以外的细胞内也出现了荧光染料，说明出现了细胞间染料传输的现象，细胞具有一定的间隙连接通讯功能，大蒜素能增加胃上皮MGC-803细胞GJIC功能，随大蒜素浓度增高，荧光染料从划痕边沿细胞向邻近细胞传递的距离逐渐增加（见图1）。

    2.2  细胞Cx 37、Cx 43 mRNA表达  对照组MGC-803细胞Cx 43 mRNA无表达，Cx 37 mRNA有表达，大蒜素作用后Cx 43 mRNA仍无表达，Cx 37 mRNA的表达升高。不同浓度大蒜素作用MGC-803细胞24、48、72 h后，Cx 37/GAPDH光密度值较对照组升高，差异有统计学意义（P<0.01），重复测量设计两因素多水平方差分析大蒜素不同浓度作用不同时间组间Cx37/ GAPDH光密度值存在差异（P<0.01），随大蒜素浓度和作用时间的增加而升高。Cx 43基因仍无表达（见图2）。

    图2  不同浓度大蒜素作用48 h对MGC-803细胞Cx 37 mRNA表达的影响

    1、3、5、7、9分别为对照组、3 μg/ml组、6 μg/ml组、9 μg/ml组、12 μg/ml组GAPDH mRNA 条带；2、4、6、8、10为对照组、3 μg/ml组、6 μg/ml组、9 μg/ml组、12 μg/ml组，Cx 37 mRNA条带，Cx 37：177 bp，GAPDH：452 bp，M表示Mark

    3  讨论

    肿瘤细胞普遍存在GJIC功能的抑制或缺陷，GJIC功能抑制使癌细胞间和（或）癌细胞与正常细胞间信息传递受阻，使肿瘤细胞失去周围正常细胞的生长调控作用而无限增殖，最后导致肿瘤形成。多数肿瘤细胞间无GJIC功能，少数肿瘤细胞有较弱的GJIC功能，而临近正常组织和良性肿瘤间的GJIC功能正常［4］。GJIC的功能可以诱导，将外源性Cx基因转染入肿瘤细胞可诱发或增强GJIC功能，肿瘤细胞生长受到抑制［5，6］。诱导剂如绿茶提取物、类维生素A、类胡萝卜素、维甲酸等能上调Cx表达，诱发或增强GJIC功能［7］，目前诱导提高肿瘤细胞间隙联结通讯功能已经成为肿瘤治疗研究的新方向。

    划痕标记染料示踪技术（SLDT）是一种检测各种培养细胞间隙连接通讯的方法，目前已广泛应用于细胞黏附和侵袭行为的检测。在荧光显微镜下观察，有GJIC功能的细胞其标记染

    沈守荣等［9］报道Cx 37、Cx 43在胃正常上皮细胞高表达，胃癌细胞仅有Cx 43基因微弱表达，Cx 37无表达，人胃癌MGC-803细胞株中Cx37有一定的表达，Cx 43基因无表达。Cx表达可以诱导，施正专等［10］用维甲酸RA、佛波酯TPA、二甲基亚砜DMSO分别可诱导胃癌细胞MGC-803 Cx 43基因的较高水平表达。二烯丙基二硫（DADS）可增加鼠肝细胞的细胞间隙连接通讯功能，增加Cx 43蛋白的表达［11］。本结果显示MGC-803细胞经大蒜素处理后Cx 37 mRNA表达增强，随作用时间延长，Cx 37 mRNA增强越明显，且与大蒜素浓度呈正相关。

    关于大蒜素抗肿瘤机制较复杂，大蒜素不仅能诱导肿瘤细胞凋亡和阻断致癌物的合成和诱导肿瘤细胞分化，而且调节机体免疫功能等，提示大蒜

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