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颈动脉支架置入术后循环血小板活化和聚集的系列变化 |
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;Carotid arteries; Stents; Platelet activation
动脉粥样硬化性狭窄的颈动脉支架置入术（CAS）以其创伤小、适应范围广等特点，已逐渐成为症状性颈动脉狭窄治疗的一个新选择［1］。CAS过程中球囊扩张成形和支架置入对血管壁的创伤、局部微栓子脱落导致远端的缺血均可激活血小板。血小板聚集形成白色血栓是急性支架内血栓形成的主要机制 ［2］。研究显示联合应用阿司匹林（ASA）加氯吡格雷较单用ASA加肝素可显著降低CAS的围手术期并发症［3］。因此目前CAS术前常规给予ASA加氯吡格雷的双抗血小板治疗，并在操作前应用栓子保护装置。
在上述措施下，CAS过程中是否还有显著的血小板激活？目前资料有限。本研究通过流式细胞术（FCM）、血小板聚集、血清中可溶性的血小板活化相关分子测定等3种方法，来观察CAS术前及术后1周内血小板激活和聚集的系列变化，以助于诠释上述问题。
1 资料和方法
1.1 研究对象 病例组入选标准：① 症状性高度颈动脉狭窄，经血管造影证实狭窄≥70%（采用北美症状性颈动脉内膜切除协作研究组 NASCET标准 ［4］）；② 对阿司匹林及氯吡格雷无禁忌证；③ 签署知情同意书。
自2006年7月至2007年3月共入选患者20例，男17例，女3例，年龄43～88岁，平均68.1±11.1岁。健康对照组20例，男16例，女4例，年龄40～75岁，平均60.1±10.4岁，无心脑血管病，无肝肾功能减退及代谢性疾病，入选前1个月内未服用过影响血小板功能的药物。
1.2 治疗方法 术前连续服用肠溶ASA 100 mg/d至少2周，氯吡格雷75 mg/d至少5 d；术中常规肝素化；术后肝素自然中和，继续服用上述双抗血小板药物至少1月。20例患者均使用了栓子保护装置（Angioguard 14例，Filterwire-EX 6例）。记录围手术期（术后30 d）内并发症的发生情况。
1.3 血液标本采集 病例组分别于CAS支架置入前即刻、术后0.5 h、18 h和6 d取血至血清管和枸缘酸钠(106 mmol/L)抗凝管。其中CAS术前即刻、术后0.5 h经动脉鞘取血，术后18 h、6 d及健康对照组于清晨空腹经肘静脉取血。血清管立即置于4℃冰箱内1 h，而后以2 000 r/min离心10 min，取上层血清置于-80℃冰箱内待测。枸缘酸钠抗凝血立即开始FCM和血小板聚集的检测。
1.4 检测样本的制备与测定
1.4.1 FCM的检测 在FACScalibur流式细胞仪上测定血小板－单核细胞聚集体（PMA）和纤维蛋白原受体（即活化的血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa，用PAC-1检测）。仪器及抗体试剂均来自美国Becton-Dickinson公司。所有的抗凝血标本均于5 min内立即开始抗体标记。
1.4.1.1 PMA检测 分别取藻红蛋白（PE）标记的CD14、异硫氰酸荧光素（FITC）标记的CD 61各10 μl置试管中混匀为测定管；另取PE标记的鼠IgG、FITC标记的鼠IgG各10 μl置试管中混匀为对照管；两管中分别加入5 min前采集的全血100 μl与试剂轻轻混匀,室温下避光作用20 min后，每管加入2 ml&nb上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9] [10] 下一页
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