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丹参干预 型胶原诱导的类风湿性关节炎大鼠血清D 二聚体的变化 |
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丹参＋MTX组，n=10）。
1.2.2 Ⅱ型胶原的配制 取液体石蜡4 ml和羊毛脂2 ml混匀并高压灭菌。加入BCG 60 mg，充分混匀。将Ⅱ型胶原30 mg溶于6 ml的0.01M 乙酸溶液中，浓度为5 mg/ml，4℃ 过夜，充分溶解，然后和完全弗氏佐剂（CFA）等体积于冰浴中混合，充分乳化，制成稳定的Ⅱ型胶原乳剂12 ml，每毫升含5 mg BCG和2.5 mgⅡ型胶原。
1.2.3 建立动物模型 每只0.1 mlⅡ型胶原乳剂在大鼠的左后足跖皮内注射诱导RA大鼠模型，第21天时再次以原剂量尾根部皮内多点激发注射免疫诱导；空白组以生理盐水注射，方法同模型组。所有动物均在清洁环境中饲养。
1.2.4 给药方法 丹参组、MTX组、丹参＋MTX组于初次免疫次日灌胃给药；丹参经胃灌服丹参（纯品，江阴天江药业有限公司）5 g/kg·d-1，用蒸馏水稀释成0.5 g/ml,每天灌服1次；MTX经胃灌服MTX（上海医药有限公司信谊制药总厂）1.75 mg/kg·周-1,用蒸馏水稀释成0.35 mg/ml,每周灌服1次；模型组大鼠每天灌服2 ml蒸馏水；空白组自由饮水。
1.2.5 关节炎指数(arthritis index, AI)评定[2] 采用关节评分法(0～4级)。评定依据为关节红肿程度和范围以及关节肿大和变形情况。0分：无关节炎；1分：有红色斑点或轻度肿胀；2分：关节部位中度肿胀；3分：严重肿胀；4分：严重肿胀且不能负重。每只大鼠四肢最高总分为16分。
1.2.6 血清DD的测定 所有大鼠于造模第35天采血，分离血清作为检测标本。DD测定采用ELISA法,试剂盒由上海麦沙生物科技有限公司提供,操作严格按照试剂盒说明进行。
1．3 统计学处理 采用Excell 2003 和SPSS 13.0统计软件对数据进行处理。所有数据以x±s 表示,不同组间用方差分析及t检验。
2 结 果
2.1 关节症状 CIA大鼠造模后饮食及活动减少, 关节出现红肿、瘀斑，后期可见毛发枯燥无光泽；而给药组上述表现不同程度地减轻；正常组饮食及活动如常，关节无异常改变。
2.2 AI评定结果。见图1。
图1 AI评分趋势曲线
模型组、丹参组、MTX组、丹参＋MTX组于2周前无明显区别，随着免疫时间延长, AI积分增加，于第3周达高峰，3周后呈下降趋势，但丹参组、MTX组、丹参＋MTX组均低于模型组，且丹参＋MTX组低于丹参及MTX单用组。
2.3 血清DD测定结果 见表1。 表1 各组大鼠血清DD的测定结果比较模型组、丹参组、MTX组、丹参＋MTX组大鼠血清DD水平明显高于空白组（P<0.01）。模型组DD水平高于丹参组、MTX组及丹参＋MTX组，丹参组DD水平高于MTX组及丹参＋MTX组，MTX组DD水平高于丹参＋MTX组（P<0.05）。
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