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Rosco纸片扩散法检测酵母样真菌对氟康唑 两性霉素B 伊曲康唑药敏试验的评价 |
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nbsp;℃ 24 h量取抑菌环直径(抑菌环边缘少量菌落生长忽略不计)。
1.2.4 折点：M27A肉汤稀释法按照NCCLS规定，氟康唑敏感≤8 μg/ml,耐药≥64 μg/ml;伊曲康唑敏感≤0.125 μg/ml,耐药≥1 μg/ml;两性霉素B敏感≤0.5 μg/ml,耐药≥2 μg/ml,药敏纸片法参考标准敏感≥21 mm,耐药≤10 mm(由丹麦Rosco公司提供参考标准)。
2 结果
2.1 Rosco纸片法检测110株临床分离的念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B 3种抗真菌药物敏感性的结果见表1。
2.2 2种方法检测结果符合情况 用2种方法对3株质控株进行重复测定，其抑菌环直径与MIC值均在规定范围内，纸片扩散法和宏量稀释法对氟康唑全敏感93株(84.5%)，全耐药9株(8.2%)，全中介2株(1.8%)，2种方法符合率为94.5%;对伊曲康唑全敏感87株(79.1%)，全耐药11株(10.0%)，全中介2株(1.8%)，2种方法符合率为90.9%;对两性霉素B全敏感100株(90.9%)，全耐药1株(1.0%)，全中介1株(1%)，2种方法符合率为92.7%。2种方法对3种药物的总符合率为92.7%。见表2。表1 临床分离念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B的药敏结果注：S为敏感，I为中介，R为耐药表2 110株念珠菌纸片扩散法与肉汤稀释法对3种抗真菌药敏结果比较注：S为敏感，I为中介，R为耐药
3 讨论
近年来，随着真菌感染发病率的不断上升，抗真菌药物被广泛应用于临床，导致真菌耐药性的出现，给临床治疗带来了很大困难，尤其老年人身体状况复杂，并发症多。近年来出现了许多对氟康唑耐药的菌株[35],常见于光滑念珠菌和克柔念珠菌，均为天然耐药的菌株，因此准确和可靠的抗真菌药敏试验是非常重要的。NCCLS于1997年推出了M27A的酵母菌标准化药敏试验方案，其准确性强、重复性好、实验室间的一致性符合率高。然而此方法操作繁琐、费时，而且有些唑类药物及5氟胞嘧啶的拖尾现象，使终点判定较为困难，且常有主观性[6],故目前在临床上难于将其作为常规方法开展，所以国内外均有其他方法如Etest试剂条，药敏试剂盒，ATB Fungus，Yeastone panel和Rosco纸片扩散法等。本研究发现Rosco纸片扩散法具有操作简便，判断结果清晰，观察时间短，成本低的优点，从临床分离的110株酵母样真菌药敏来看，大多数真菌表现出很好的敏感性，特别是临床最常见的白色念珠菌，与文献报道相似[7]。
在实验中我们选用的氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑是治疗真菌的典型药物，一直以来用于大多数真菌的感染治疗，所以十分具有临床意义。氟康唑1990年开始在美国应用于临床，对于白色念珠菌的治疗接近于100%，并且具有良好的口服生物利用度，但对于泌尿系统的治疗不佳;伊曲康唑1992年在美国应用于临床，对真菌的细胞色素P450(CYP450)的作用更加专一，与食物同服时吸收明显增加，能有效地控制病情，并用于长期维持治疗，也用来治疗一些不常见的真菌感染，但与某些经CYP代谢的其他药物同用时，会有严重的药物干扰作用;两性霉素B是真菌杀菌剂，20世纪50年代开始应用于临床，抗菌谱广，对于危及生命的真菌感染以及一些对唑类药物不敏感的念珠菌感染也用其治疗，但因其不良反应大而受到限制，研究发现通过对两性霉素B进行改造可以降低其毒性，已
在美国欧洲上市。
Rosco纸片扩散法与NCCLS肉汤稀释法有很好的一致性，我们实验表明，2种方法对氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B 3种抗真菌药的敏感性符合率分别为94.5%、90.9%、92.7%，总符合率为92.7%。我们在实验中注意到，导致结果误差的主要原因是拖尾现象造成的终点判读偏差。
Rosco纸片扩散法与NCCLS肉汤稀释法比较，在区分敏感株与耐药株方面准确率较高，但在鉴别耐药株与中介株方面略有不足，本实验Rosco纸片扩散法对所试菌株中耐药株与中介株的检出率为19.1%，接近国际报道[6，810]。
本实验发现Rosco纸片扩散法24 h和48 h读取结果其抑菌环直径没有差异。综上所述，Rosco纸片法在临床上具有良好的实用性，能为临床上一页 [1] [2] [3] [4] [5] 下一页
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