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流式细胞术检测血小板相关IgG的临床应用

>组别例数FCMELISAPAIgG

  阳性率(%)

MFI阳性血小板

  百分率(%)

PAIgG

  阳性率(%)

fg/血小板ITP(包括Evans综合征)47

87.2

2.26±2.291)

44.1±29.01)

83.0

6.02±8.901)

非免疫性血小板减少1315.40.33±0.3917.5±9.47.71.18±1.60其它免疫系统疾病1863.20.95±1.0833.7±21.947.44.06±3.12AIHA1000.16±0.0710.7±7.500.42±0.28正常对照组31  /0.24±0.1516.6±8.4   /0.82±0.66

  与正常对照组比较,1) P<0.01

  3 讨论

  ITP的发病机制是机体免疫系统失常,产生抗血小板自身抗体使血小板过度破坏,临床上尚无特异的诊断方法。PAIg是ITP实验诊断的一项敏感指标,在各种检测方法中以ELISA应用最广〔2,3〕。近10年来,国外将FCM用于PAIgG的研究,发现FCM检测的灵敏度较高〔3〕。我们用FCM检测47例ITP患者PAIgG,也发现大多数患者的MFI增高以及阳性血小板百分率增高。人们已发现ITP等免疫性血小板减少症患者外周血血小板大小和形态可有改变,大血小板可为年轻的血小板或由8倍体巨核细胞所产生〔7〕,表明存在大小和形态不同的血小板群体。ITP患者FCM检测PAIgG的荧光强度(log值)图中出现峰形改变,提示存在结合

了不同量IgG的血小板群体。国外资料尚未提及有关峰形的问题,但我们认为峰形异常同样具有诊断价值。

  FCM检测PAIgG的阳性率大体与ELISA相同,而且两种方法符合率达85.1%。这说明FCM方法和ELISA一样,对PAIg检测具有很高的敏感性。但FCM的操作比ELISA简便、省时,需血量少,并且可随时测定单个标本,而不必像ELISA那样需等一批标本才能测定。因此,有条件的单位可用FCM代替ELISA测定PAIg。

  PAIg检测的主要缺点是特异性差。FCM并不能克服这一缺点。60% SLE等免疫系统疾病的患者,FCM检测PAIg结果为阳性。这是由于这类疾病常可引起免疫性血小板减少。此外少数非免疫性血小板减少的患者也呈阳性。近年来,人们也研究了一些具有较高的特异性的方法,如血小板抗原单克隆抗体固相化法(MAIPA)〔8〕、改良抗原捕获ELISA法(MACE)和血小板相关IgG特性试验(PAICA)〔5〕等,这些方法应用了抗血小板膜糖蛋白的单克隆抗体,但阳性率低,方法较繁琐,难以在临床推广。有人认为,如将FCM与这些阳性率低但特异性高的方法联用,可提高PAIg检测的敏感性与特异性,从而进一步提高ITP免疫诊断的水平〔8〕。

  江苏省卫生厅科研基金资助(H9910)

  参考文献

  1,Dixon R, Rosse W, Ebbert L. Quantitative deter-mination of antibody in idiopathic thrombocytopenic purpura. Correlation of serum and platelet-bound antibody with clinical response. N Engl J Med, 1975, 292: 230~236

  2,Nel J D, Stevens K. A new method for the simulta-nious quantitation of platelet-bound immunoglobulin (IgG) and complement (C3) employing an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) procedure. Br J Haematol, 1980, 44: 281~290

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