EIP均以光密度表示，IDE活性单位为U/mg蛋白。数据以±s 表示。两组间比较采用t检验，多组间分析采用方差分析和Newman-Keu ls检验，相关分析采用直线回归分析。 结 果
一、大鼠原代肝细胞的EIG、EIP水平和IDE活性(表1)
培养后再加入氯喹培养2h的B1细胞，其EIG、EIP水平和IDE活性低于IR细胞，高于在无胰岛素的 培养液中孵育16h后再加入氯喹培养2h的B2细胞。同时，B1、B2细胞 的EIG、EIP水平和IDE活性分别高于A1、A2细胞，但与对照细胞无差异。
二、大鼠肝细胞EIG、EIP水平与IDE活性及胰岛素敏感性的关系(表2)
EIG、EIP水平在上述三组细胞均与IDE活性呈显著正相关。在IR细胞和对照细胞 ，EIG、EIP与14C-2-DG掺入率和14C-醋酸盐掺入率均呈显著负相关，但在 空白细胞上述指标间无相关性。此外，三组细胞的EIG均与EIP呈显著正相关。
讨 论
本研究结果显示，IR细胞
模型的EIP水平显著高于对照细胞，表明大鼠肝细胞出现IR后，其I DE酶蛋白翻译量明显增强；在IR细胞模型的IR状态形成过程中(A1细胞)或已经出现IR(B1细 胞)后加入氯喹培养，IR细胞的EIP水平在显著下降的同时，其胰岛素敏感性得到相应改善； 向对照 细胞中(A2细胞和B2细胞)加入氯喹培养后，细胞的EIP也显著下降。本组还显示，用氯喹处 理16h的A1、A2细胞的EIP水平分别低于氯喹处理2 h的B1、B2细胞。上述结果提示，氯喹 可以明显抑制IR细胞和对照细胞的EIP水平，而且抑制作用的强弱与其作用时间长短有关。 由于基因转录水平和翻译水平均可影响编码蛋白的表达量，因此在观察到酶蛋白表达量变化 后，有必要进一步了解酶基因mRNA转录水平的变化，以初步了解酶蛋白表达量增加的原因。 本组资料显示，IR细胞的IDE基因mRNA转录水平显著高于对照细胞，提示大鼠肝细胞出现IR 后，其EIP水平增加可 能是由于该酶基因转录水平增强所致。向细胞培养液中加入氯喹处理后，无论是IR细胞，还 是对照细胞，也无论氯喹处理时间的长短，大鼠肝细胞的EIG水平的变化与氯喹对IDE酶蛋白 表达量的影响基本一致，而且影响程度的大小也与氯喹作用时间的长短密切相关，这一结果 表明氯喹可以明显抑制IR细胞和对照细胞的EIG水平，并提示氯喹对IDE酶蛋白翻译的抑制作 用可能是通过作用于上游的IDE基因转录的某些环节来实现的。高浓度胰岛素刺激IDE基因转 录和氯喹抑制IDE基因转录的原因均有待于进一步研究。
为探讨大鼠肝细胞EIP、EIG水平与IDE活性及胰岛素敏感性的关系，本组资料还对上述指标 进行了相关分析。为排除氯喹的影响以及氯喹作用时间不同的可能影响，本组只选择了IR细 胞、对照细胞和空白细胞进行分析。结果显示，EIP及EIG水平在三组细胞均与IDE活性呈显 著正相关，提示IDE活性与IDE酶蛋白表达水平及基因转录水平有良好的一致性。本组同时显 示，IDE酶蛋白表达水平及基因转录水平在IR细胞和对照细胞均与反映细胞胰岛素敏感性的 两种掺入率呈显著负相关，提示当IDE基因表达亢进时，细胞的胰岛素敏感性将会下降，这 与胰岛素降解过快可能是IR的原因之一理论相符合〔9〕。
综上所述，本研究结果提示，大鼠肝细胞的EIG和EIP与其胰岛素敏感性之间呈负相关；高浓 度胰岛素可刺激大鼠肝细胞的IDE基因mRNA及酶蛋白的表达，而氯喹则对其起明显的抑制作 用；胰岛素和氯喹对大鼠肝细胞EIG的影响可能是通过对IDE基因转录水平的影响来实现的。
基金项目：四川省卫生厅基金资助项目( 920047)；重庆市科委应用基础研究基金(97-4-175)
参 考 文 献
1，Authier F, Ponsner BF, Bergeron JJ. Insulin- degrading enzyme. Clin Invest Med, 1996,19:149-160.
2，Powrie JK, Smith GD, Shojaee-Moradie F, et al. Mode of action of chl oroquine in patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus. Am J Physio l, 1991,260:E897-904.
3，李晨钟， 张素华， 舒昌达， 等. 胰岛素诱导的胰岛素抵抗细胞模型
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