酪氨酸激酶受体Eph亚族的研究进展

　　1.4 Heks(human eph-like-kinases)

　　Heks( Hek4,5,7,8,11)[10]。是从人胚脑cDNA文库中用PCR和5 RACE方法克隆出来的一组基因，采用的是根据该亚族高度保守的胞内催化功能域WTAPEAI和VCKVSDFG基序而设计合成，氨基酸同源性分析表明 hek4（新命名EphA3）与cek4(99%)和mek4(98%)同源性最高，即它们的同源基因，编码983个氨基酸，有典型的ATP结合位点（GXGXXG），其779位Tyr为自身磷酸位点，主要在人胎盘、心、脑、肺、肝组织中表达，还在两株T白血病细胞株（JM，HSB-21）和一株前B细胞株中表达，另外在1/28慢性淋巴细胞白血病及2/39急性髓细胞白血病表达，表明它在正常淋巴系统的功能和分化中及一些人恶淋巴肿瘤中有一定作用。

　　Hek5（新命名EphB2）即以前命名的Erk(Elk-related kinase)基因[11]，与ERK蛋白（extracellular signal-regulated kinases）是不同的，后者在MAPK级联中可被MEK磷酸化，Iwase胞内激酶区的片段，通过RNA印迹分析表明Erk在鼠中表达降低，而成年鼠的胃的中已检测不到该基因表达，而且首次在人胃癌组织中检测到Erk表达显著高于相应正常组织，故而认为Erk了也许在胃的胚胎及肿瘤发生中起一定作用。随后Kiyodawa等[12]的研究更证实了这点，他们用此cDNA片段做探针克隆出全长Hek5序列，与其他Eph亚族基因氨基酸序列比较，在氨基端有一个不完全信号肽区，与Cek5（92.5%）,Nuk(91.1%)同源性最高。Hek5主要在上皮来源的组织（甲状腺，结肠等）及肿瘤细胞系（胃癌、食道癌、结肠癌等）表达，另外在非上皮来源的骨肉瘤细胞系Huo-3NI有表达，在各种肿瘤组织中的表达均几倍高于相应正常组织，其中胃癌显著75%高表达，未发现扩增及重排。

　　Hek5的鸡同源物cek5(chicken embryo kinase)是从10天龄鸡胚cDNA表达文库中用抗磷酸酪氨酸抗筛选出来，蛋白
质印迹表明Cek5在鸡胚脑中高表达，在肾、肺、肠等低表达，另外，同时还得到了一个Cke5异型体（Variant）Cek5+的部分序列，发现它在膜并列区域多了16个氨基酸的插段，也许是选择剪切（alternative splicing）不同的结果，并且这是神经系统特有的，与此类似，Cek10(新命名EphB3)也有异型体Cek10+,在膜并列区域有15个氨基酸的插段[13]，目前对这种现象还所知甚少。

　　1.5 其他新基因

　　Tck,(tail and cement gland kinase),XElk,P17a[14]是从非洲蟾蜍克隆出来，分别与Hek2（79%）、Elk(91%)、Myk-1(80%)同源性最高，XElk是Elk的蟾蜍属同源物，Tck xElk均在卵母细胞成熟过程中有不同程度表达，故推测在特定组织胚胎发育的信号传导中起一定作用。

　　2 Eph亚族受体的配体研究

　　阐明Eph亚族各成员的生理功能及研究信号转导途径的第一步依赖于配体的分离，目前已分离出8种不同的配体分为ephrin-A和ephrin-B subclass(Eph family receptor interacting proteins).ephrin-A(A1～A5)类配体靠糖基磷脂酰肌醇链（GP1-linkage）锚定在细胞膜上，PI-PLC能水解GPI，使其从细胞表面释放下来具备可溶性；ephrin-B(B1～B3)类配体是跨膜蛋白，结合研究表明该亚族已发现的配体可与多个受体以不同的亲和力交叉结合且发挥不同的作用[15]。配体在组织中的表达广泛，其结构可分为四个区即信号区、结合区、spacer区、疏水区、胞外区有四个保守的半胱氨酸残

　　B61（新命名ephrin-A1）是该亚族第一个发现的配体，早先是从IL-1或TNF诱导的人脐静脉内皮细胞中克隆的立早反应基因，存在可溶和以GPI锚固定于膜上二种形式，研究发现后者是Eck配体可

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