结核病分子流行病学的概况和进展

　　3.指纹技术中出现的问题和对策：(1)探针：插入要素为插入染色体DNA内能多倍重复的序列，大多采用IS6110作探针，它与IS986、IS987三者都属于IS3的家族，存在于所有结核分支杆菌群中，但IS6110不适于牛分支杆菌，要换用IS1080。第3种探针是质粒pTBN12，是富含鸟嘌呤和胞嘧啶的重复序列(PGRS)和直接重复探针。第4种是短串联重复序列(major polymorphism tandem repeat,MPTR)。(2) DNA指纹图谱：结核分支杆菌DNA系列基因存在多态性，不同菌株有不同数目和不同部位的DNA系列基因。多态性：在RFLP图谱上呈零带谱或只有一个带谱(拷贝)者，为无效图谱；有的严格规定5个带谱以上才能进行比较分析，一般都在10个左右。Das等［5］在南印度的检查有40%的IS6110图谱仅有1个拷贝，泰国1997年检查为29%呈1个拷贝，越南为20%［17］。稳定性：指纹另一特征为大多具有稳定性，不稳定者仅占5．6％～8%，如瑞士、德克萨斯和香港地区。稳定性还表现在细菌的敏感性与耐药性上，已有多篇文献明确提出耐药性不影响RFLP图谱，也就是在RFLP上区别不出耐药与否［1，2，18］。集簇性(clustering)：细菌菌型相似或相同，则可归入一个集簇或簇，一般一个簇有2～6例患者，暴发流行时会增多。

　　我国的一篇报道未发现零带谱，而在3～15个带谱，多数在5～10个IS6110拷贝，未提及簇，可能会在下一步流行病学分析中提出。

　　我国还是可能会遇到无效带谱，因为最近又在旧金山发现不含IS6110者，都为中国或越南人［19］。另一报告，179例中有3例亚洲和非洲人为单一拷贝［20］。已报道的除了东南亚的中国、蒙古、韩国、泰国、马来西亚、越南，还有南亚的印度、巴基斯坦，再往西，也门、坦桑尼亚等国人也有此表现，一旦遇到，做了IS6110的RFLP后，要补充一种探针如MPTR，或PGRS，或直接重复序列，或pTBN12，指纹技术除RFLP外还要另加PFGE或spoliogtyping才行。

　　四、发展中国家开展结核病分子流行病学的重点

　　发达国家无一例外地已开展了DNA指纹研究，并日趋深入、持久、广泛，多数已将其列入常规检查，究其原因，有两个方面：一是有足够的基金支持，人才技术和仪器设备；另一个是结核病呈低发流行，各国每年新发菌阳患者不多，有能力全部进行检查，而且以家族传播为主，很少进行定期大规模流调。检查方式大多采用回顾性，将常规存档入库的培养物进行指纹检查，再结合人口统计学资料(性别、年龄、种族、出生地、所在地)、临床表现、治疗情况和随访结果作有关分析［5-7，19-22］。

　　发展中国家绝大多数是结核病高发流行地区，病例众多，但资金、技术、设备短缺，不能照搬；我国已开展第四次流调，理想的是把指纹检查结合进行，但实际上不太可能。指纹检查用于

　　我们应该在这3个重点中再抓一些重点，继续作一些开拓性的研究。

参考文献

　　1.李传友，马玙，邢爱英，等．DNA指纹技术方法学的建立及在结核分支杆菌菌株鉴定中的应用．中华结核和呼吸杂志，1999，22∶142-144.

　　2.张天民．结核病分子流行病学进展.中华流行病学杂志，1998，19（5-B)∶235-239.

　　3.Kiers A, Drost AP, van Soolingen D, et al. Use of DNA fingerprinting in international source case finding during a large outbreak of tuberculosis in the Netherland. Int J Tuberc Lung Dis, 1997，1：239-245.

　　4.Godfrey-Faussett P, Githui W, Batchlsr B, et al. Recurrence of HIV-related tuberculosis in an endemic area may be due to relapse or reinfection.

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