胃癌前病变不同转归中p53 bcl2基因的表达以及细胞增殖活性的研究

　　【Key words】　Stomach neoplasms; Precancerous conditions; Gene,P53; Gene,bcl-2; Prolifera ting cell nuclear antigen

　　在胃癌的发生过程中，胃黏膜的肠上皮化生和异型增生是重要的癌前病变，但并非所有的肠上皮化生和异型增生均演变为癌。研究显示，肿瘤是一种基因异常变化的疾病，癌变过程的每一阶段都存在癌基因和抑癌基因的一系列变化〔1〕。为此，我们检测p53、bcl-2基因以及增殖细胞核抗原(PCNA)在发生和不发生癌变的肠上皮化生及异型增生标本中的表达，以探讨各指标在胃癌前病变不同转归中的作用。

　　资料与方法

　　一、材料

　　1.胃癌组标本:1984年1月至1996年6月间，经胃镜黏膜活检和(或)手术切除胃标本病理检查诊断为癌、资料完整的病例共52例，均为男性，年龄62～82岁，平均70.1岁。Lauren分型:肠型胃癌40例，弥漫型胃癌12例。将该组根据不同阶段再分为两个部分：(1)胃癌标本：即经胃镜黏膜活检或手术切除病理诊断为胃癌的标本；(2)癌前病变标本：在诊断胃癌之前，与癌发生部位相同的黏膜活检病理诊断为中度以上肠上皮化生（18例）或异型增生（34例）的标本。癌前病变时年龄为60～79岁(平均67.3岁)，随访时间为1年～11年5个月(平均为3年8个月)。

　　2.非癌组标本:所有标本均取自与胃癌组同期检查的患者，其间诊断为中度或中度以上肠上皮化生和(或)异型增生的病例共489例，进一步筛选出第一次诊断之后有连续随访结果、且随访时间在1年以上而未发生癌变、与胃癌组年龄相当的病例共56例作为非癌组，其中肠上皮化生36例，异型增生20例，均为男性，年龄为60～82岁(平均67.0岁)，随访时间为1年10个月至11年11个月(平均6年10个月)，明显长于胃癌组。

　　二、方法

　　p53、bcl-2蛋白表达及PCNA均采用免疫组化LSAB法检测。抗p53单克隆抗体(DO-1)和抗bcl-2单克隆抗体购于北京中山生物技术有限公司，PCNA单克隆抗体和LSAB试剂盒为DAKO公司(日本)产品。实验步骤按试剂盒说明书进行。阳性对照为已知阳性组织切片在同一条件下反应，阴性对照以正常兔血清代替第一抗体。

　　三、结果判断：

　　p53、bcl-2结果按如下方法进行评分:(1)阳性着色程度:无着色为0，浅着色为1，深着色为2；(2)阳性着色范围:无着色为0，着色小于1/3为1，着色大于1/3为2，弥漫性着色为3。然后将以上两项相加为最后结果:大于或等于3为阳性病例。　　PCNA计数用PCNA标记指数(PCNA LI):　LI=PCNA阳性细胞数/计数细胞总数×100%。

　　四、统计学处理

　　所得数据采用χ2检验、t检验。

　　结　果

　　一、胃癌癌变前后p53、bcl-2表达的比较

　　见表1，2。在肠型胃癌中，癌前p53、bcl-2阳性者到癌变时一直均为阳性，无1例转阴。在弥漫型胃癌，由癌前发展到癌时bcl-2有1例转为阴性。p53阳性着色位于细胞核，呈棕黄色颗粒状(图1)；bcl-2阳性着色位于细胞浆，呈棕黄色(图2)。各切片显色分布不均，以片状和局灶性为主，少数为弥漫性分布。

表1　52例胃癌癌变前后的p53表达的自身对照(例数)

表2　52例胃癌癌变前后的bcl-2表达的自身对照(例数)

图1　　p53免疫组化阳性片　细胞核着色DAB显色　×400

上一页  [1] [2] [3] [4] 下一页