培养长骨生长发育的影响,表明使用该模型的观察结果是可靠的。 Schwartz等〔10〕1985年利用CO2孵箱建立了小鼠胚胎长骨体外培养模型,并于1991年采用该模型观察了雌激素和雄激素对长骨生长发育的影响,发现培养48h后可观察到雌二醇和睾丸酮对骨生长的明显促进作用,并呈性别依赖性。我们将Schwartz模型由固定悬浮式培养改进为旋转悬浮式培养,使培养环境更接近体内动态状况,并克服了骨组织粘附生长在滤膜上的缺点,同时还由于封闭培养而减少了污染。利用浸没式一次通气旋转装置,可用隔热恒温培养箱代替价格昂贵的CO2孵箱,更加方便、经济。
实验结果提示:利用该模型观察雌激素类化合物对骨组织的药理活性,浓度适当时,48h后即可直观地观察到化合物对骨生长的影响情况,结合组织学观察,能较准确地从骨吸收和骨形成两方面反映化合物对骨的药理作用,可用于雌激素类化合物抗骨质疏松症药理活性的快速初筛,进一步缩小了采用骨质疏松症动物模型进行筛选的范围。
基金项目:国家自然科学基金重点项目资助课题(39430120)
参考文献
1,刘忠厚. 骨质疏松症. 北京:化学工业出版社, 1992.33-210.
2,Jillca RL, Hangoc G, Girasole G, et al. Increased osteoclast developme nt after estrogen loss: mediation by interleukin-6. Sciences,1992,257:88-91.
3,Gerstenfeld LC, Shapiro FD. Expression of bone-specific genes by hypertrophic c hondrocytes: implication of the complex functions of the hypertrophic chondrocyt es during endochondral bone development. J cell Biochem, 1996,62:1-9.
4,Bodine PVN , Herderson RA, Green J, et al. Estrogen receptor-α is developmenta l ly regulated during osteoblast differentiation and contributes to selective resp onsiveness of gene expression. Endocrinology, 1998, 139: 2048-2057.
5,Mano H, Yuasa T, Kameda T, et al. Mammalian mature osteoclast s as estrogen target cells. Biochem Biophys Res Comm,1996,223:637-642.
6,Kameda T, Mano H, Yuasa T, et al. Estrogen inhibits bone resorption by directly inducing apoptosis of the bone-resorbing osteoclasts. J Exp Med, 1997,186:489 -495.
7,Ben-Hur H, Thole HH, Mashiah A, et al. Estrogen, progesterone and testosterone receptors in human fetal cartilaginous tissue: immunohistochemical studies. Calc if Tissue Int, 1997,60:520-526.
8,郑虎,翁玲玲. 可用作带有雌激素结构的骨靶向药物的化合物〔P〕.中 国专利:1997.94111687,1997-05-21.
9,Zheng H, Weng LL. Bone resportion inhibition / osteogenesis p romotion pharmaceutical compo
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