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蒙古沙土鼠急性脑缺血时新皮质中单胺类神经递质代谢的变化 |
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土鼠新皮层内脑缺血时各单胺递质及其代谢产物的变化情况，以分析脑缺血时这些物质变化的规律并比较其敏感性。
1 材料与方法
1.1 实验对象 人工饲养的蒙古沙土鼠30只，体重40～80 g，平均(59.8±10.1)g，雄14只，雌16只，按随机区组方法，按窝别分为十个区组，然后从每一区组中随机分出一只为对照、二只为实验动物。
1.2 脑缺血动物模型的建立 吸入乙醚麻醉后，正中切开沙土鼠颈部腹面皮肤约2 cm，钝性分离皮下组织，游离左颈总动脉并予双重结扎，然后缝合皮肤放回笼中观察。对照组除不予结扎动脉外，其余处理步骤完全相同。术后连续观察6 h，再作乙醚麻醉，从耳后用利剪快速断头处死。对实验动物术后表现，根据Ohnok等修改方法进行观察评分［3］。根据症状轻重分三组：中风指数≥10分、1～9分、0分分别为症状严重组A组、症状较轻组B、无症状组C组，各为4，9，7只。
1.3 脑组织的处理 断头后迅速剥出全脑组织，放入冰生理盐水中洗净，除去表面脑膜及粗大血管，然后置于冰玻璃板上分离出新皮层置试管中，立即插入二氧化碳干冰中冷冻，置-75 ℃超低温冰箱保存。分析前称其湿重，称重后加入30倍脑组织处理液，用超声细胞破碎器在冰浴的条件下，将脑组织制备成匀浆，然后在4 ℃下、15 000 g的相对离心力的条件下离心20 min，吸取上清液并过滤。
1.4 分析仪器与方法 采用Beckman公司的Model 332型梯度洗脱高效液相色谱系统，反相C18Ultrasphere ODS分析柱(250 mm×4.6 mm,d=5μ)，BAS公司LC-3A型电化学检测器，一次进样50 μl，即可测出去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、色氨酸(Trp)含量(仿Saller及Salama法)［6,7］。
2 结果
2.1 各组新皮质内单胺递质及其代谢产物和色氨酸水平比较 见表1。在对照组中，左、右侧新皮层内色氨酸、单胺递质及其代谢产物的含量比较差异无显著性。在结扎侧新皮层内，NE，DOPAC，HVA，5-HIAA含量4组间差异有显著性。症状严重组较其余三组NE，5-HT含量明显下降，DOPAC，HVA，5-HIAA含量明显升高，差异均有高度显著性(P＜0.01)；症状较轻组NE含量与无症状组相比也有下降，差异亦有显著性；症状严重组DA含量较假手术组明显降低，差异亦显著；Trp含量变化不明显。在结扎对侧新皮层内，HVA，5-HIAA含量4组间差异有高度显著性，且症状严重组较其余三组明显升高(P＜0.01)，Trp变化不明显。
表1 各组双侧新皮层内色氨酸、单胺递质及代谢产物含量的变化(±s)
组别 n NE
(ng/g湿重) DA
(ng/g湿重) 5-HT
(ng/g湿重) DOPAC
(ng/g湿重) HVA
(ng/g湿重) 5-HIAA
(ng/g湿重) Trp
(μg/g湿重)
A 结扎侧 4 433.21±115.22 747.14±476.65 349.35±54.11 209.17±112.29 2225.30±523.80 228.36±40.19 11.955±2.355
对侧 532.10±145.09 1668.32±524.85 571.95±150.70 88.16±31.64 1620.11±1190.86 147.43±62.29 21.650±13.365
B 结扎侧 9 699.40±222.39 1299.68±747.77 652.11±111.61 78.76±84.32 1224.90±1044.23 96.61±69.90 17.427±14.121
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