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增殖细胞核抗原在子宫颈鳞癌组织中的表达 |
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PCNA increased with the aggravation of pathological stage in cancers(P＜0.05).Strong positive expression rate of PCNA was higher in advanced cancer,but the differences were not statistically significant (P＞0.05).Conclusion PCNA is one of the important criteria reflecting biological behavior of the cervical squamous carcinoma.
Key words cervix neoplasms;cancer;cyclins;immunohistochemistry
增殖细胞核抗原(PCNA)是一种仅在增殖细胞中合成和表达的36 kD多肽，其阳性表达说明该细胞处于增殖状态，与细胞增殖周期有密切关系。本实验应用免疫组化方法，检测PCNA在子宫颈鳞状细胞癌(简称宫颈鳞癌)，子宫颈非典型增生及正常宫颈组织中的表达，旨在了解正常宫颈的鳞状上皮细胞及癌细胞的增殖活性，判断PCNA与宫颈鳞癌生物学行为及预后的关系。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集湖南医科大学附属第二医院妇产科1988年1月至1997年9月手术切除标本及湖南省肿瘤医院1996年1月至8月放射治疗前标本57例，且经病理证实为宫颈鳞癌52例，宫颈非典型增生5例，取同期正常宫颈组织标本8例。标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，切片厚4 μm。肿瘤分级按WHO的分级方法，Ⅰ级6例，Ⅱ级32例，Ⅲ级14例；临床分期按1985年FIGO标准，Ⅰ期14例，Ⅱ期25例，Ⅲ期13例。
1.2 主要试剂 鼠抗人PCNA单克隆抗体(Pc10,1:30)为丹麦Dako公司产品，SP及AEC显色试剂盒为Zymed公司产品，购自福州迈新公司。
1.3 免疫组化方法 按试剂盒说明书进行，但A液阻断时间延长至15 min，血清孵育时间延长至20 min，胃蛋白酶消化30 min，可获得满意结果。实验中以肝癌阳性切片作为阳性对照，用PBS液代替一抗作为每次染色的阴性对照。
1.4 结果判断 由两位有经验的病理科教授采用双盲法对结果进行判定。细胞核内见红色颗粒判断为PCNA阳性细胞。据阳性细胞占癌细胞数的比率(每个视野200个细胞，高倍镜下数4～5个视野，取均值)，再结合着色程度综合判断：“+”即＜25%，着色浅红色；++即26%～50%，呈桔红色；++++即51%～75%，鲜红色；++++即75%以上，鲜红至深红色。+++～++++判断为强阳性表达。
1.5 统计学处理 采用χ2检验。
2 结果
2.1 PCNA在不同类型宫颈组织中的表达 宫颈鳞癌、非典型增生及正常宫颈组织中PCNA的阳性表达及强阳性表达率分别为100%，44.29%；100%，40%；87.5%，0%。鳞癌与正常宫颈的强阳性表达差异有显著性(P＜0.05)。PCNA阳性产物定位于细胞核，胞浆不着色。在宫颈鳞癌组织中，PCNA阳性细胞分布不均，癌巢周边及浸润前缘细胞密集，着色呈鲜红色，部分呈深红色，癌巢中央特别是有明显角化的细胞，表达极低。分化差的肿瘤，癌旁增生明显，周围淋巴细胞及淋巴滤泡生发中心均呈阳性表达。宫颈非典型增生组织中，阳性细胞的分布呈规律性，主要位于基底层细胞，部分达棘细胞层。正常宫颈组织中的阳性细胞仅限于基底层，呈零星分布，着色浅。
2.2 PCNA的表达与肿瘤病理分级 52例宫颈鳞癌标本全部阳性表达，但强阳性表达率随肿瘤病理级别的提高而显著增高，统计学处理，差异具有显著性(χ2＝20.36，P＜0.05)。见附表。
附表 PCNA阳性表达与肿瘤病理分级的关系(例数，%)
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