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急性下呼吸道感染时Hib OMP特异抗体测定的意义 |
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刘秀云 江载芳 杨永弘
摘要 我们建立了b型流感嗜血杆菌(Hib)外膜蛋白(OMP)特异抗体测定的间接酶联免疫吸附法(ELISA)，同时联合血、尿细菌抗原检测，对70例肺炎患儿及30例健康儿童进行研究。结果有19/70(27.1%例)肺炎患儿产生Hib OMP抗体反应，除外1例交叉反应，余18例诊断为Hib感染，其中5例未查到Hib抗原，以Hib OMP特异抗体反应得到诊断。表明Hib OMP抗体测定可提高小儿Hib肺炎的病原诊断率。
关键词 抗体测定 b型嗜血流感杆菌 肺炎
Hib OMP specific antibody assays in the diagnosis
of acute lower respirtory tract infection in children
Liu Xiuyun, Jiang Zaifang, Yang Yonghong
(Beijing Children′s Hospital, Beijing 100045)
Abstract An indirect enzyme linked absorbent assays (ELISA) to measure the antibody against haemophilus influenzae type b (Hib) outer menbrane protions (OMP) was established and combined with antigen detection from blood and urine. 70 cases of pneumonia and 30 cases of healthy control were investigated. The results showed that antibody response were observed in 19 (27.1%) of the 70 children with pneumonia. Excluding one case of cross-reaction, the others 18 cases, were diagnosed as Hib infection five caese had no Hib antigen evidence. Their diagnosis were confirmed only by the antibody response. The results suggest that the assay of antibody to Hib OMP can elevate the rate of the pathological diagnosis of Hib pneumonia.
Key words The assay of specific antibody Haemophilus influenzae type b Pneumonia
细菌抗体测定用于呼吸道感染的细菌病原学研究在国外一些实验室已有建立，并且证实可协助细菌病原的流行病学调查［1，2］。近年的研究表明［3，4］，HI感染时机体可产生针对其OMP的特异性抗体，幼小婴儿也有此抗体的存在，而荚膜多糖抗体在2岁以内婴幼儿几乎不产生。因此，我们建立了Hib OMP特异性抗体测定的间接ELISA方法，以协助小婴儿下呼吸道感染的病原学诊断。
对象和方法
一、研究对象
依照制订的临床诊断标准，随机选择1994年12月～1995年5月北京儿童医院5岁以下(新生儿除外)，起病1周以内肺炎(包括6例毛细支气管炎)70例，平均年龄1岁6个月(2个月～5岁)。取血前停用抗生素超过24小时。对照组为5岁以下(新生儿除外)健康儿童30例，其中男16例，女14例，平均年龄为1岁10个月(4个月～5岁)。
二、研究方法
1.Hib OMP抗体测定：选用Hib国际标准菌株6880的OMP与临床分离的Hib菌株C44的OMP混合作为包被抗原，建立间接ELlSA法测定Hib OMP特异的抗体IgG、IgM。采用Sarcosy1方法提取OMP。结果判定：Hib OMP特异抗体的测定均以OD＜0.3为阴性。抗体滴度的计算是以OD值为纵坐标，稀释度倒数为横坐标，寻其OD值为0.3时所对应的稀释度，即为抗体滴度。双份血清滴度增加3倍以上为抗体反应，可作为HI感染的诊断标准［2[1] [2] 下一页
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