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血清葡萄糖测定的溶血干扰及结果校正 |
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李矫倾
葡萄糖测定的己糖激酶法是临床上为数不多的用于常规化验的参考方法。一般认为对于轻度溶血，脂血、黄疸等因素不会受干扰。但我们在用日立7170全自动生化分析仪测定溶血标本时，常发现结果偏低。本文对此现象进行探讨，并对两种仪器不同波长测定血糖进行比较，对溶血指数与血红蛋白进行测定，探讨对溶血标本的结果进行校正的方法。
材料与方法
一、标本来源：120例本院门诊病人的空腹静脉血。
二、试剂：1.葡萄糖测定(己糖激酶法)试剂盒(德国Human公司)。(2)葡萄糖标准液：葡萄糖555 mmol/L(卫生部××生物制品研究所)。3.血红蛋白质控品：128.9 g/L(××市慈城生化试剂厂)。
三、仪器：1.日立7170型全自动生化分析仪(××日立公司)。2.Vitalab Selectra全自动生化分析仪(××威图公司)。
四、方法：1.将120份病人血清用于日立全自动生化仪(波长405 nm/340 nm)己糖激酶法测定血糖，血糖范围在5.0～8.0 mmol/L，然后分别加入血红蛋白质控品，使含血红蛋白浓度分别为0.5 g/L，1.0 g/L和1.5 g/L，使用日立全自动生化仪(波长405 nm/340nm)和威图全自动生化仪(波长380 nm/340nm)己糖激酶法测定葡萄糖，同时比较不同浓度血红蛋白对血清葡萄糖结果的影响，以获得需要补偿的数值。2.测定含不同浓度血红蛋白标本的溶血指数。
结 果
1.120例血清标本内不同浓度的血红蛋白用己糖激酶测得的葡萄糖浓度，在日立生化分析仪上的结果见表1。经统计学处理，P＜0.05，差异有显著性意义。
表1 日立7170分析仪测得不同血红蛋白
浓度标本血清葡萄糖含量
分组 血清标本内
血红蛋白(g/L) 血糖测定值
(mmol/L) 溶血指数 应补偿血糖值
()
1 0 6.6 0 0.4
2 0.5 6.14 1 0.46
3 1.0 6.08 2 0.52
4 1.5 5.7 3 0.9
2.己糖激酶法威图型全自动生化仪，波长380 nm/340 nm测定血糖范围在5.0～8.0 mmol/L，血糖结果均数为6.64 mmol/L，加入不同浓度血红蛋白0.5 g/L、1.0 g/L、1.5 g/L后，血糖结果均数为6.53 mmol/L、6.449 mmol/L、6.359 mmol/L，经统计学处理结果P＞0.05，差异无显著性意义。
3.对120例无溶血标本加入血红蛋白测定溶血指数，结果表明血红蛋白浓度与溶血指数呈正相关，可用于对溶血标本进行补偿，见表2。
表2 溶血指数与血红蛋白的关系
溶 血 指 数
1 2 3 4 5 6
血红蛋白(g/L) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
应补偿血糖() 0.46 0.52 0.9 1.5 2.2 ＞3.0
注：①血糖值的单位为mmol/L。②血糖补偿范围为5～8 mmol/L。③溶血指数＞6的标本，建议重做。
讨 论
血清葡萄糖测定时，虽然公认己糖激酶法标本不受溶血干扰，但我们发现部分仪器会受标本轻度溶血的影响。经过两种仪器测定比较，发现由于两个参考波长(即次波长)不同，而对标本结果有明显的影响。根据双波长原理，λ1和λ2的吸光度差为△A，双波长其中一个波长为吸收物质的最大吸收峰；另一个波长为吸收物质不吸收或吸收很少的波长，吸光度差△A是为消除非特征性吸收影响的吸光度。根据这一原理，日立全自动生化仪由于次波长为450 nm，对不同溶血程度的标本有一定影响，因为溶血指数的测定波长为600 nm/570 nm，在此处溶血标本有着最大的吸收峰，但在450 nm处附近亦有一定的吸光度。因此，扣除了背影吸收，使血糖结果明显偏低。我们还采用威图全自动生化仪，波长380 nm/340 nm测定血糖作对照，证明在次波长380 nm以下溶血对血糖的影响较小。日立全自动生化仪对溶血指数的测定是对溶血标本测定血糖结果的一种补偿。我们用实验建立了溶血指数与血红蛋白含量的比例关系，并提出用[1] [2] 下一页
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