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原发性高血压患者血管紧张素转换酶基因多态性与胰岛素抵抗的关系 |
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占伊扬 钱卫冲 王海燕
【摘 要】 目的:了解我国原发性高血压患者血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失多态性与胰岛素抵抗的关系。方法:ACE基因多态性检测采用PCR法,胰岛素敏感性指数(ISI)为-Log(空腹血糖×空腹胰岛素)。结果:按ACE基因型DD、ID、II顺序,三组ISI绝对值(-3.23±0.78,-3.35±0.76,-3.51±0.56)有不同程度增大,但统计学检验各基因型间无显著差异(P>0.05)。结论:尚不能认为我国原发性高血压患者ACE基因插入/缺失多态性与胰岛素抵抗有关。 【关键词】 原发性高血压 血管紧张素转换酶 胰岛素抵抗
血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)为肾素-血管紧张素系统关键成份之一,参与血管活性肽的代谢,在血压维持方面起重要作用,其相应基因无疑是原发性高血压的重要候选基因,不少国内外研究[1~3]认为,其第16内含子插入/缺失(Insertion/Deletion,I/D)多态性与原发性高压患者存在一定关系,胰岛素抵抗是比较公认的原发性高血压的独立危险因素,那么究竟原发性高血压患者ACE各基因型间的胰岛素抵抗是否存在差异值得研究,而国内尚未见文献报道。本文目的在于初步探讨原发性高血压患者ACE各基因型与胰岛素抵抗的关系。
1 资料与方法
1.1 研究对象 在我省金坛市某社区心血管流行病监测点进行心血管病危险因素调查。根据1978年WHO高血压诊断标准,以收缩压≥160mmHg(1mmHg=0.133kPa),舒张压≥95mmHg,选取原发性高血压患者112例,通过病史询问、体检排除继发性高血压,所有患者均无服用降压药物史。 1.2 方法 ①标本采集:禁食10小时以上,取外周静脉血5ml,分离后血清送检血脂,将凝血块置-20℃冰箱,半年内行ACE多态性检测,避免反复冻融;②血胰岛素测定用竞争放射免疫分析法,药物购自中国原子能研究所;③空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法;④胰岛素敏感性指数(Insulin Sensitivity Index,ISI)为-Log(空腹血糖×空腹胰岛素)。该指数经美国两个种族320例研究材料证实与胰岛素钳夹技术测定的胰岛素敏感指数显著相关。国内李光伟[4]引进该指数分析874例中国人,包括正常人、糖耐量异常及糖尿病者的胰岛素敏感性后,表明其能适用于测定中国人不同糖代谢状态人群的胰岛素敏感性;⑤人基因组DNA提取采用酚-氯仿法;⑥ACE基因插入/缺失多态性的检测:根据参考文献[5]设计两对引物,Sense:5 -CTGCAGACCACTCCCATCCTTTCT-3;Anti-sense:5 -GTAGTGGCCATCACATTCGTCAGAT-3 。上述引物由中国科学院上海细胞生物所赛尔医学生物工程公司合成。Tag酶购自上海Promega公司。PCR反应程序:首先94℃预变性5分钟;然后94℃变性30秒,58.5℃退火30秒,72℃延伸60秒,共循环35次;最后72℃充分延伸5分钟。运用PE2400DNA合成仪扩增。PCR产物经1.2%琼脂糖电泳,溴化乙锭染色,紫外灯下观察,凝胶电泳分析系统上拍摄照片。 1.3 统计学分析 各计量资料间均用均数±标准(±s)表示,组间比较采用方差分析。
2 结 果
2.1 ACE基因I/D多态性 ACE基因插入/缺失多态性经PCR扩增可产生两种长度的片段,490bp的插入片段(I)和190bp的缺失片段(D),紫外灯下呈现三种条带:DD型(仅有190bp带型),ID型(含有490bp和190bp两种带型),II型(仅有490bp带型)。本次检测发现112例原发性高血压患者中DD型34例,占30.4%;ID型46例,占41.1%;II型32例,占28.5%。 2.2 各基因型间临床资料比较 各项临床资料在三个基因型间均无显著差异(P>0.05),见表1。
表1 ACE各基因型各项临床资料比较(±s)
型别 年龄 (岁) 性别 (男/女) 身高 (m) 体重 (kg) 腰围 (cm) 臀围 (cm) 收缩压 (mmHg) 舒张压 (mmHg) 胆固醇
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