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肺癌中增殖细胞核抗原表达的意义 |
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廖小明 王昌明 曾锦荣 陈梅唏
增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)能真实地反映细胞增殖活动 ［1］。近年来，PCNA作为原位检测肿瘤细胞增殖状态的一种新技术开始应用于肿瘤 细胞动力学研究，并实验应用S-P免疫组化方法研究PCNA在肺癌中表达的临床意义。
1 材料与方法
1.1 材料 来源于我院1988～1998年间我院肺癌石蜡包埋标本32 例，按WHO标准分类：非小细胞癌28例，其中鳞癌16例，腺癌10例，大细胞癌2例，小细胞癌 4例；男24例，女8例，年龄38～74岁，平均64.5岁，术前均未行放疗及化疗。
病理分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例。病理分级：Ⅰ级4例，Ⅱ级12例，Ⅲ级14例。取 5例正常肺组织作对照。石蜡标本作连续切片，制成5μm厚备用。
1.2 抗体及染色方法 本研究采用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接 (S-P)法，用华美生物技术公司生产的即用型试剂盒，第一抗体为抗PCNA单克隆抗体PC10(M axin Biotech公司生产)，反应60分钟。
1.3 结果判定标准及计数方法 PCNA阳性着色表现为细胞核被染成棕黄 色或棕褐色，高倍镜下呈细颗粒状。随机观察10个高倍视野，计每个高倍视野100个肿瘤细 胞中阳性细胞数取其平均值，分为1～4级(1级=0%～25%，2级=26%～50%，3级=51%～75%，4 级＝76%～100%)。所得数据采用Ridit合并频数统计，病死率的相关分析采用substraction graph系统进行分析，分为2级：弱级(1～2级)和强级(3～4级)。
2 结 果
S-P免疫组织化学染色结果，正常肺组织切片未见表达，而肺癌组织切片中均有阳性反应， 表现为细胞核被染成棕黄色或棕褐色。PCNA的表达与肺癌的分级、分期呈正相关，随着组织 学分级及临床分期的增高，其染色强度增高，阳性细胞的检出率亦随之增高。各组之间比较 行Ridit合并频数统计表明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级之间以及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期之间均有显著差异(P＜ 0.01)(见表1)。
表1 肺癌中PCNA表达与分级、分期的关系
组 别 PCNA表达级别
1 2 3 4 n
肺癌分期(TMN)
Ⅰ期 2
2
1
0
5
Ⅱ期 1 6 3 2 12
Ⅲ期 0 2 7 5 14
肺癌分级
Ⅰ期 3 1 0 0 4
Ⅱ期 1 4 7 0 12
Ⅲ期 0 2 6 7 16
淋巴结转移阳性组PCNA表达亦显著高于淋巴转移阴性组(P＜0.05)(见表2)。 对16例患者进行随访，随访时间2～96个月，按生存时间的长短分为4组，行Substraction g raph相关检验呈显著负相关(r=－0.65，P＜0.01)，肺癌PCNA强级者(3 级＋4级)，其术后病死率明显高于弱级(1级＋2级)(见表3)。
表2 PCNA的表达与淋巴转移的关系
组 别 n PCNA表达级别
1 2 3 4
淋巴结转移
阴 性 18
5
8
3
2
阳 性 14 1 2 7 4
注：P值＜0.05。
表3 PCNA表达与术后病死率的相关分析
组 别 n PCNA表达级别
1 2 3 4
PCNA表达
弱 级 9 2 1 5 1
强 级 7 2 4 1 0
3 讨 论
增殖细胞核抗原是近年来出现的反应细胞增殖的一种很好的标记物［2］。PCNA作为 一种核内蛋白质，它的出现明显与细胞增殖有关，在静止期细胞其量很少，G1晚期开始增 加，S期达到高峰，G2M期明显下降［3］，其量的变化与DNA合成相一致，因此认 为PCNA作为评价细胞增殖状态的一个主要指标。由于PCNA反映细胞增殖程度所处周期，因而 可用于良恶性肿瘤的鉴别和肿瘤恶性程度及预后的评估。
肺癌患者的预后与组织学类型、临床分期、病理学有很大关系，一般来[1] [2] 下一页
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