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静脉与硅胶管小间隙桥接神经的实验研究 |
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实际上是一只鼠)，每只鼠随机取右腿或左腿的股神经为静脉桥接组，剩下的另一组为硅胶管桥接组。
二、实验方法
氯胺酮腹腔麻醉，去除大腿内侧毛，按无菌手术原则在放大10倍手术显微镜下自大腿近端分离并显露股神经，暴露15mm，每只鼠自股四头肌肌分支以上5mm处做双侧股神经切断，近侧神经断端切除3mm，用11-0显微缝线将两端缝合，留有3mm间隙。将预先取下的大鼠新鲜腔静脉及1.0mm内径硅胶管(长均为1cm)，分别桥接于两侧神经外，桥接后的静脉及硅胶管端分别用11-0显微缝线固定于神经外膜上。在距神经远、近断端5mm处及小间隙中央静脉与硅胶管外壁分别用碳素墨水标记，逐层缝合切口，放回笼中饲养。
三、观察方法
1.大体观察大鼠术后伸膝运动恢复的时间，并在放大10倍手术显微镜下进行显微解剖观察。
2.组织学检查：取下标本，10%中性福尔马林液固定，各组标本均在预先标记的神经近、远端5mm及小间隙中央做横切面，经梯度酒精、丙酮脱水，Epon 812包埋，AO超薄切片机切出1μm厚片，作HE及Gless镀银染色，光镜下进行组织学检查。
3.神经纤维密度计数：光镜下每个横切面分为五个象限，即左上、左下、右上、右下、中，每个象限随机拍摄一张照片，在放大400倍的照片上人工计数神经纤维的数量，求出均数后除以照片所代表的实际组织面积即为神经纤维密度。
结果
一、大体及显微解剖观察
静脉组术后5周明显恢复自主伸膝运动，而硅胶管组仅恢复轻微伸膝运动。静脉组：静脉外壁与周围组织有轻度粘连；神经在静脉室中正常生长，再生神经除在吻合的小间隙部可见缝线外，不能辨认出神经吻合部位；静脉室中神经干与静脉粘连轻，桥接的静脉可完整去除；神经干在小间隙部直径与两端相似，无假性神经瘤形成。硅胶管组：硅管外壁均被一层厚而致密的结缔组织包绕；硅室中硅管与神经之间可见少量无色粘稠液体填充；再生神经通过小间隙部，神经干在小间隙部直径较两端明显细小，约为正常神经干的1/2；神经干无膨大，无假性神经瘤形成。
二、组织学观察
光镜下桥接处结缔组织增生均明显减少，可见增生的雪旺氏细胞，神经纤维排列紊乱，神经束样结构不明显，远端5mm横切面，神经纤维均位于原神经束结构内，分布均匀。静脉组再生轴索数目多；硅胶管组再生轴索数目少，周围间质胶原化明显(图1、2、3)。
图1 近端5mm大鼠股神经正常结构(放大200倍)
图2 静脉组：远端5mm大鼠股神经横切面(放大200倍)再生轴索数目多，整个内部结构较成熟
图3 硅胶管组：远端5mm大鼠股神经横切面
(放大200倍)再生轴索数目少，间质水肿，胶原化明显
三、神经纤维密度计数(近端5mm为7679±448个/mm2)结果见附表。
附表 神经纤维密度计数结果统计表(±s)
n=10 静脉组 硅胶管组 t值 P值
小间隙部 5305±581 3310±335 6.202 ＜0.001
远端5mm 2123±153 1679±109 3.361 ＜0.01
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